amd_mao
第1楼2006/04/25
真菌毒素的检测：（黄曲霉毒素）
黄曲霉毒素，alfatoxin，B1,B2,G1,G2，M1 ，其中B1的毒性是最毒，而且含量是最多的，M1是牛吃了含有黄曲霉毒素的饲料后在其体内代谢而成的，一般就在乳品中检测，其产生机理和物理，化学性质就不多说了，直接说方法：
1）TLC薄层色谱法，或薄层层析法Thin Layer Chromatography，其流程与经典薄层法相同，就不缀述了，最后定量是利用黄曲霉毒素在紫外灯下发荧光来定量，过去都是利用肉眼与标准样品比较来判读的，不知现在的薄层扫描仪是否能做到用仪器判读。该方法的特点是慢（操作繁琐），对检验人员副作用大（要接触标准样品以及有毒的有机溶剂），不准确（用肉眼判读，每个人可能判读的不一样，也有可能同一个人对同一个样品两次不同判读也有差别），不过很便宜。
2）ELISA方法，与经典ELISA方法相同，无非就是竞争性抑止，最后用酶标仪读取吸光度值判读，其特点是快速（相对简单），对检验人员毒副作用相对较小（也会接触标准样品），特异性（利用抗体抗原反应），价格适中（尤其是做大量样品的时候，不会重复做标准曲线，一块板子只需做一次标准曲线），不过该方法也有缺点，比如你的样品量较少，对于96孔板，你需要拆其中1条或2条来做，有几个孔需要用来做曲线，其他的用来做样品，下次再有样品的时候，你还学要再做曲线，这样就会重复浪费孔数而增加成本，而且板子在使用前都是真空包装，未用完的需要冷藏保存，再用时要再回到室温，如果反复几次也会有影响，再就是生物制品都会有批此间有差异的问题，尤其国产的。
3）HPLC方法，我觉得HPLC应该有三种，一种时IAC(Immunoaffinity Column，免疫亲和柱）做净化，一种是SPE作净化，第三种就是用其他萃取方法做净化，比如液夜萃取，我没有接触过，就不说了，先说IAC作净化，柱子填充有黄曲霉毒素的抗体凝胶，特异性强，快速，简单，但是价格昂贵，SPE柱作净化，特异性没有IAC强，但也比较快速，简单，价格也会低点，仪器这块，单不说HPLC其他配置，先说需要有荧光检测器，紫外检测器虽然也可以检测，但已经无法满足要求了，要有柱后衍生系统，所以这个一般单位难度就大点，而且HPLC也需要有标阳来定性，对检验人员也有潜在的危险性。
4）IAC+荧光计的方法，这个荧光计是专门的荧光计，可以直接得出黄曲霉毒素的浓度，无需做曲线，仪器标定也很简单，无需标样，所以价格也是不菲啊。
应助达人
赛默飞实验室产品焕新计划有奖调研！
【七月征文】不一YOUNG实验“猿”
下周三开幕，iCS2024光谱大会，报名可看回放！
色谱耗材品限时大促，火热进行中！
