Agilent用户手册

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我用的仪器是Agilent 1100，使用过程中有几个体会，与大家交流探讨。

1. 开关机、分析样品的顺序：
打开总电源、稳压器开关→打开电脑→打开仪器上所有开关→等待自检通过→进入on line界面，可以同时打开off line界面，便于分析→编辑方法，完成分析
（注意假如流动相用到盐，外循环用10%异丙醇以每秒10滴的流速冲洗）→关offline、online界面→关仪器各开关和外循环冲洗开关→关电脑→关稳压器、总电源开关。

2. 分析样品顺序：以C18柱，流动相为单泵举例说明
正确安装柱子，确保不漏液（查柱压是否正常）→用甲醇-水（乙腈-水）系统冲洗柱子20min（比例根据流动相设定，比如流动相是磷酸盐缓冲液-甲醇（30：70），就设水-甲醇（30：70））→打开旁通阀，用100%的流动相快速（3ml/min)运行3min，使流动相迅速到达柱子端→关闭旁通阀，以0.8-1.2ml/min的流速走柱30min，柱温一般设到35度，检测器波长看具体要求，观察基线是否平直，柱压是否稳定→单针运行待分析的样品，保留时间设得长些，一般至少30min，看后面有没有小杂质峰→假如出峰良好，设序列进样，分析所有样品；假如不好，调节流动相比例自“打开旁通阀”重复上述步骤，直到满意为止→最后在offline里数据处理，一般设slope为1,width为0.04，积分时间可以锁定，baseline on valleys在基线漂移时非常有用。

3.操作注意事项：
1）一次配足够的流动相，重新配制会带来保留时间不一致的麻烦
2）注意及时倒掉废液
3）流动相用0.45微米的滤膜抽滤瓶过滤
4）假如设置序列自动进样过夜时，确保充足的流动相，检查各瓶的体积设置是否与实际体积一致，可以设一个安全体积，在0.1L以下自动停泵保护柱子
5）假如是四元泵，记住下面的A和D用水相，上面的B和C用有机相。比如我们的做法是A——水，B——甲醇，C——乙腈，D——缓冲盐