樣品在LC-PDA有訊號 SQD沒訊號 想問問高手們的建議

正负离子模式，流动相酸碱性，调一调

为什么要用碳酸氢铵呢? 试一试在两中加0.1%FA.

质谱系统确实很少见到用碳酸氢铵的，正离子模式还是用有机酸比较多

应助达人

理论上来说，单纯依靠LC-ESI-MS，你这个问题存在无解的可能。

举个极端的例子，假设你的样品里面含有这么一个组分“甲苯”，这个大爷在紫外（PDA也好，DAD也罢）检测器上面的响应那是杠杠滴；可是对于ESI-MS检测器而言，那就是个隐身高手，看不见的。

如果不是这么的极端，那么你可以试试正负离子都采集看看，改改流动相的pH看看。流动相的缓冲盐么，推荐【醋酸铵（或甲酸铵）、甲酸（或乙酸）、氨水】的组合。

且容小弟娓娓道來~~
我有個藥品本來的分析方法是用 HPLC-PDA,這個分析方法是用磷酸鹽緩衝溶液

因為要分析一個低濃度的不純物 (4ppb)--簡稱A好了,所以要打到500uL的進樣量才能夠看的到A這個訊號.

可是大家都知道本來進樣量只有20uL,當我打到這麼大的進樣量時,很多本來看不到的東西都會出現了.會出現B.C.D.E.F

根據ICH以及美國藥典,這些BCDEF 只要到達20 ppb我就得要去鑑定

要鑑定這麼低濃度的第一個就是用質譜儀,那麼本來用磷酸鹽緩衝溶液就不能繼續用了.

改用碳酸氫銨的原因是因為與磷酸鹽緩衝溶液pKa範圍相近 可以替代

因為藥廠的分析方法多是用HPLC-PDA為主 之後送檢也是以這為主
因而質譜鑑定的部分就得遷就HPLC-PDA

但這麼一來 就會有很多限制不能改

不過看到這麼多前輩給予指導,小弟都會嘗試看看...謝謝大家的溫暖阿




幾位前輩們的建議小弟會去試看看

搞不懂你的说法

20ppb ?
你是大量注射看到的
原始浓度应该也是没 20ppb
怎需要去定性 ...

你该不会是用 标準品的浓度去换算未知物的浓度吧 ?!?!

HPLC-PDA可以

LC-MS 这样搞叫做自找苦吃

没标準品 LC-MS 强度跟浓度关系都可以"看看就好"

...虽然磷酸蛮好用的 ..
有个方式sop 还没finalized之前把HPLC-PDA改成
LC-MS可用..之前有个project就是这样搞
另外你都打到 500uL 都已经是制备级column
倒不如用fraction collector收一收...浓缩作 NMR
除非你心里已经对未知物有底
不然你要用 MS 解未知物...
说真的有点自找麻烦

有没有APCI源?换个电离模式试试？

多謝大大的建議 小弟把一些回應回答在下面



APCI 負離子模式 目前還在測試中 有好消息的話 會馬上來跟大家分享報告 謝謝各位大大