省部重点实验室
第1楼2012/06/26
②各自的用途?
紫外检测器使用于大部分常见具有紫外吸收有机物质和部分无机物质.示差检测是凡具有与流动相折光率不同的样品组分,均可使用示差折光检测器检测.
示差折光检测器对没有紫外吸收的物质,如高分子化合物、糖类、脂肪烷烃等都能够检测。在凝胶色谱中示差折光检测器是必不可少的,尤其对聚合物,如聚乙烯、聚乙二醇、丁苯橡胶等的分子量分布的测定。另外在制备色谱中也经常用到。还适用于流动相紫外吸收本地大,不适于紫外吸收检测的体系。
示差折光检测器与紫外可见检测器相比,灵敏度较低,一般不适用于痕量分析,也不适用于梯度洗脱。
紫外检测器对占物质总数约80%的有紫外吸收的物质均可检测,既可测190--350 nm范围的光吸收变化,也可向可见光范围350---700 nm延伸。
示差检测器属于通用性检测器,如果选择合适的溶剂,几乎所有的物质都可以进行检测。
紫外检测器适用于有机分子具紫外或可见光吸收基团,有较强的紫外或可见光吸收能力的物质检测.
示差检测器属于通用性检测器,可以分析绝大多数的物质.
用途:一般当物质在200-400nm有紫外吸收时,考虑用紫外检测器。无吸收或吸收弱时可以考虑示差检测器。
③它们有什么各自优点?
紫外吸收检测器它不仅有较好的选择性和较高的灵敏度,而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感,因此既可用于等度洗脱,也可用于梯度洗脱。示差折光检测器这一系统通用性强、操作简单.
示差检测器属于总体性能浓度型检测器,其响应值取决于柱后流出液折射率的变化,采用含有样品的流出液和不含样品的流出液的同一物理量的示差测量。其响应信号与溶质的浓度成正比。属于中等灵敏度检测器,检测限可达1mg/ml-0.1mg/ml。
紫外检测器灵敏度高,噪音低,线性范围宽,对流速和温度均不敏感,可于制备色谱。由于灵敏高,因此既使是那些光吸收小、消光系数低的物质也可用UV检测器进行微量分析。
示差折光检测器是目前液相色谱中常用的一种检测器,它可与输液泵,色谱柱,进样器等组成凝胶渗透色谱仪或高速液相色谱仪系统,也可以配置适当的进样系统作为单独的分析仪器使用。对所有溶质都有响应,某些不能用选择性检测器检测的组分,如高分子化合物、糖类、脂肪烷烃等,可用示差检测器检测。由于不同的液体折光不同,因此本检测器通用性强,可广泛地应用于化工、石油、医药、食品等领域为科研、生产服务。
紫外检测器有较好的选择性和较高的灵敏度,而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感,因此既可用于等度洗脱,也可用于梯度洗脱,示差检测器几乎对所有溶质都有响应.
紫外优点:常用、方便。示差检测器:弱吸收物质定量准确。
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第2楼2012/06/26
④它们之间的区别?
示差折光检测器这一系统灵敏度低(检测下限为10-7g/ml),流动相的变化会引起折光率的变化,因此,它既不适用于痕量分析,也不适用于梯度洗脱样品的检测。UV检测的主要缺点在于紫外不吸收的化合物灵敏度很低。
1.紫外是选择性检测器,示差是通用性检测器;
2.紫外检测器灵敏度高,示差检测器灵敏度低;
3.紫外检测器可进行梯度洗脱,示差检测器不能进行梯度洗脱;
4.紫外检测器对压力和温度不敏感,示差检测器很敏感。
示差检测在原理上虽然是通用型检测器,但是它的灵敏度低,和梯度脱洗不相容,因此它对于HPLC来说不是理想的检测器。
而紫外检测器既可用于等度洗脱,也可用于梯度洗脱.
①紫外检测器的波长范围是根据什么来的?
连续光源(氘灯)发出的光,通过狭缝、透镜、光栅、反射镜等光路组件形成单一波长的平行光束。通过光栅的调节可得到不同波长。
波长范围应该是根据光源来确定的,不同光源波长范围也不一样。
光波根据光的传播频率不一样而划分的。
②紫外的范围是什么?AU表示的是什么意思?范围的大小的好坏之处(越大越好还是越小越好)?
紫外的测量范围一般为0.0003---5.12(AUFS),常用为0.005---2.0(AUFS)。
AU就是吸收度单位(absorbance unit),通过公式换算:
Absorbance is a logarithmic scale, so that an absorbance unit (AU) of 1.0 is equal to 90% absorbance (that is, 10% transmission), an AU of 2.0 is equal to 99%, an AU of 3.0 is equal to 99.9%, and so on.
物理上测得物质的透光率,然后取负对数得到吸收度。1.0对应90%的吸收,即透过了0.1,取10为底数的负对数值得到1.0,2.0对应99%的吸收,即透过了0.01,取10为底数的负对数值得到2.0。
(marxinfy):紫外的范围:一般指200-400nm,AU:相应值的表示单位,相当于多少伏的电压。范围的大小应该适中较好,实际工作中一般就需要1AU左右。
③示差检测器的折射率范围大小如何计算?是怎么来计算的?范围越大越好还是越小越好?理由是什么?
根据稀溶液中相加和定律,溶液的折射率等于溶剂和溶质各自的折射率乘以各自的摩尔浓度之和。n=c0n0+cini
式中ni为溶质的折射率,ci为溶质的摩尔百分数,c0为溶剂的摩尔百分数。因为ci+c0=1,n越大,可测量的浓度范围也越大。
④示差检测器的温控范围是怎么来的?范围的大小对仪器的性能和检测有什么好坏之处?
折光物质由于温度变化引起该物质密度变化,进而导致折射率的改变。常用有机溶剂折射率的温度系数(dn/dT)在-1.05×10-4/度(水)和-6.4×10-4/度(苯)之间变化,平均值为-4.9×10-4/度。当温度变化10-4度时,折光率变化约在10-7RIU,这就意味着对于目前可接受的噪声水平10-7RIU,需要将温度控制在-10-4~+10-4范围之内。温度控制范围越小,噪声越低,信噪比就越大,越有利于检测