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RP-C18 柱子无法分离ATP，ADP

garlic2006

2012/07/26

液相色谱（LC）

请教各位高手，RP-C18 柱子分离含有ATP,ADP,AMP的标准品混合液，无法将ATP,ADP分离开，

色谱条件为：

流动相为0.05MKH2PO4：甲醇=90:10，pH=6.5 柱温25℃（实际温度到29℃），检测波长254nm

将流动相比例改为93:7后ATP，ADP峰分开了一些，但还是重合很多，盐溶液比例过高好像容易堵柱子，

请教高手，该如何优化条件，将这个峰形分开。先谢谢了！

PS：柱子为新买的，做上次做预实验把泵头给堵了，很纠结

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ixiaog

第1楼2012/07/26

之前有做过着几种物质，盐的比例用的是95%，国产的色谱柱还是分不开，后来相同的流动相，换了跟进口的色谱柱，就分的很好。。

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