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色谱柱替代的问题

jiaodandan

2012/08/23

液相色谱（LC）

各位从事研发行业的版友，我最近接到一个新的产品的方法开发，参考了别人家的分析条件。
别家：色谱柱为月旭C18(4.6*150,5um)、
A相为0.025%TFA的20%乙腈、
B相为0.025%TFA的乙腈、
T 0 60 60.1 75

B 10 60 10 10
样品浓度为1mg/ml、进样量为20ul
目前我将其中的色谱柱替换为agilent SB-C18 其余不变，为什么我的峰宽有5min，这两家的色谱柱差别有那么大吗？

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有水有渝

第1楼2012/08/23

应助达人

把进样量减小或样品浓度降10倍试试

0

jiaodandan

第2楼2012/08/23

嗯，明天白天我再来试下。
有水有渝(xky0230699) 发表:把进样量减小或样品浓度降10倍试试

0

秋醉虞阳

第3楼2012/08/23

不同牌子柱子还是有差别的

0

jiaodandan

第4楼2012/08/24

还是不行，柱效很差，怀疑色谱柱自身不太好了，准备更换Thermo的C18柱再试下。
jiaodandan(jiaodandan) 发表:嗯，明天白天我再来试下。

0

houjjun

第5楼2012/08/27

可能是浓度太大了，稀释1000倍试试

0

richies

第6楼2012/08/28

如果浓度大,不仅峰宽了,峰高也会满值啊

如果确认柱子没问题,出现这样的事情,一般是PH的问题,不同的柱子对PH的敏感度是不一样的,这个就是柱子的差异性

别说不同品牌的柱子,就是同品牌,不同批次的柱子,都有这个问题

0

jiaodandan

第7楼2012/08/28

呵呵，我用的agilent1260 EZchrom的软件，1mg/ml的浓度进样量为20ul，峰高只有400多，而峰面积确是10位数，我现在是自己开发一个拥有4个手型C原子的化合物，它们的极性非常靠近，想用C18柱将它们分开！有办法吗？
richies(richies) 发表:如果浓度大,不仅峰宽了,峰高也会满值啊

如果确认柱子没问题,出现这样的事情,一般是PH的问题,不同的柱子对PH的敏感度是不一样的,这个就是柱子的差异性

别说不同品牌的柱子,就是同品牌,不同批次的柱子,都有这个问题

0

仰望天空的鱼

第8楼2012/08/29

相同填料的色谱柱的粒径、键合方式等对保留行为都有影响，最好找一个各个方面都差不多的来做

0

jiaodandan

第9楼2012/08/29

今天买了根YMC PACK PRO C18 150*6.0，5.0um的色谱柱明天再试试看！再不能分开这些同分异构体就再跟换流动相了！

0

小虾米

第10楼2012/11/03

调调浓度应该有点改观

0

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