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液相色谱测饲料中维生素B1出峰时间

liran1002

2012/09/10

液相色谱（LC）

用高效液相色谱测维生素B1时用高250mm的柱子多长时间出峰啊走了40分钟还不出峰（国标上用的是长150mm柱子）求专家解惑

分
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秋醉虞阳

第1楼2012/09/11

看你流动相和组分的。
流动相：缓冲液[取庚烷磺酸钠0.25g，用磷酸钠溶液（取磷酸钠38g，加水至1OOOml使溶解，用磷酸调pH值至2.1）溶解并稀释成1OOOml]-乙腈(94:6)
流速：1.0ml/min
检测波长：210nm
柱温：室温
进样量：20μl
色　谱　柱：ODS C18 250mm * 4.6mm * 5.0μm( 长度*内径*颗粒大小 )
上述情况5分钟左右就能出峰了。是否你的浓度不够或者柱子不适合。

0

蓝人

第2楼2012/09/14

应助达人

基线是什么样的

传个图看看

还有有没有没采集上

通道错了

等原因

0

liran1002

第3楼2012/09/14

我用的流动相是：取庚烷磺酸钠1.1g,EDTA0.05g,加水溶解，再加入25ml冰乙酸，5ml三乙胺定容1000ml。取此溶液860ml,加入140ml甲醇。
流速：0.8ml/min
检测波长：460nm
柱温：30
进样量：10μl
色　谱　柱：ODS C18 250mm * 4.6mm * 5.0μm( 长度*内径*颗粒大小 )
估计是样品中含量太少了哈哈...提高含量后在36min是出峰啦
秋醉虞阳(wangjianhua1102) 发表:看你流动相和组分的。
流动相：缓冲液[取庚烷磺酸钠0.25g，用磷酸钠溶液（取磷酸钠38g，加水至1OOOml使溶解，用磷酸调pH值至2.1）溶解并稀释成1OOOml]-乙腈(94:6)
流速：1.0ml/min
检测波长：210nm
柱温：室温
进样量：20μl
色　谱　柱：ODS C18 250mm * 4.6mm * 5.0μm( 长度*内径*颗粒大小 )
上述情况5分钟左右就能出峰了。是否你的浓度不够或者柱子不适合。

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albert

第4楼2012/09/21

应助达人

我也是这么做的，但是可惜的是，我就没看到峰出在什么地方
liran1002(liran1002) 发表:我用的流动相是：取庚烷磺酸钠1.1g,EDTA0.05g,加水溶解，再加入25ml冰乙酸，5ml三乙胺定容1000ml。取此溶液860ml,加入140ml甲醇。
流速：0.8ml/min
检测波长：460nm
柱温：30
进样量：10μl
色　谱　柱：ODS C18 250mm * 4.6mm * 5.0μm( 长度*内径*颗粒大小 )
估计是样品中含量太少了哈哈...提高含量后在36min是出峰啦

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valorb

第5楼2012/10/07

这个没做过

0

liran1002

第6楼2012/10/13

[我也是这么做的，但是可惜的是，我就没看到峰出在什么地方[/quote]
呵呵，是吗我是用禽用多维做的，含量还少多一些

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