yu3226033
第2楼2012/09/23
SEC色谱柱是硅胶基质的体积排阻色谱柱,也可以称之为“球状蛋白亲水改性硅胶柱”(中国药典门冬酰胺酶指定色谱柱)。其色谱填料为高纯度、具有良好稳定性的硅胶微球表面键合亲水性聚合物。月旭公司采用特殊的表面修饰技术,确保了该填料具有良好的稳定性和批与批之间的重现性。
对于样品来说,有些容易离解的物质,我们通过加缓冲盐,可以抑制样品的离解!有很好的保留!也从而改善了峰型!
对于固定相来说,因为不同的厂家对柱子的封尾的技术不同,导致的是不同的型号的柱子的硅醇基的性质不同,有的是缔合硅胶,硅醇基的极性小,有的是自由硅醇基,极性较大,他们因为封尾的基团不同,方法不同,导致残留的硅醇基的树木等的不同。加缓冲盐,可以抑制柱子中硅醇基与易离解的物质间的离子交换,导致峰拖尾等!对固定相,缓冲盐对他们都有作用,只是看在不同情况下,哪个占优势而已.
arvid2007
第5楼2012/09/23
水相中的缓冲盐,主要是起到抑制样品解离的作用,使样品成分子状态,峰型较好。
加入缓冲盐对目标物分离有改善峰型(有些很难分离的物质使用缓冲液后分离非常漂亮),减少峰拖尾,改善分离度。
在反相条件下可离解的化合物一般都有氨基和羧基,他们的Pka在1-11之间,选择正确的缓冲液PH值可保证可离解的官能团以一种形式存在,离子形式或中性化合物的形式。如果样品的PH值对柱子有伤害,则缓冲溶液可使其变温和从而减小其危害。选择缓冲溶液在反相液相色谱方法中对于优化尖峰,捡出限,以及获得稳定的保留时间十分重要
(一般是酸样加酸,碱样加碱,也就是我们理论上常说的PH要控制在PKA加减2以外。)
yu3226033
第8楼2012/09/23
当被分析物在反相条件下可离解,或样品的PH值在2.5-7之外时,就需要缓冲液。在反相条件下可离解的化合物一般都有氨基和羧基,他们的Pka在1-11之间,选择正确的缓冲液PH值可保证可离解的官能团以一种形式存在,离子形式或中性化合物的形式。如果样品的PH值对柱子有伤害,则缓冲溶液可使其变温和从而减小其危害。
反相高效液相色谱中缓冲体系PH值的选择在反相高效液相色谱分析中,选择正确的缓冲液PH值,对可离解的化合物分析的重现性十分重要,不恰当的PH值可能导致不对称峰,宽峰,分裂峰或肩峰,而尖锐的,对称的峰是定量分析中获得低的检测限以,两次分析之间较低的相对标准偏差(RSD)和保留时间的高重现性的前提。
简单来说就是让化合物在最稳定的状态下得到分离,保证良好的峰形和可重复的保留时间。使用缓冲盐之后的仪器处理,不当处理损坏仪器和色谱柱。