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实验室小故事-PCR

nkwinter

2012/11/23
食品检测

PCR，是分子生物学实验室最最常做的实验之一，凡是在实验室呆过一段时间的人都会知道普通的PCR没有什么技术含量，就是把各种试剂放在那个0.2 mL的小离心管里，丢进那个名叫PCR仪的仪器里，打开程序，运行，然后过一两个小时，精彩出炉，跑个电泳，就知道结果了。

不知道大家还记不记得当初自己最先做PCR时的故事。灌水写写我的经历吧。刚开始进实验室的时候我就是从提DNA和做PCR开始的，提DNA的故事在别的故事里写吧，这里就讲讲我做PCR的故事吧。那个时候，带我的大师兄和师姐都是做生物信息的，他们就把我自己丢在实验室里帮他们做检测。那个实验室人可多了，我记得光学生就有四五十个呢，我们这些做毕业论文的根本没人管。不过还好，大师兄派了个硕士师兄陪我做，我们那会可是做的96孔板呢，我师兄是个做实验的狂野派，我们做PCR的时候，那都是一下子配个10多毫升的体系，然后用排枪一分，加上模板，就开工了，一上午就做他个五六板，一开始由于DNA的原因，实验总是失败，还好，后来修改了提取方法，成功率大大的提高了呢。想起来，那时候我同学跟的那个师兄是个细致派，他们做的实验精致，也没有我们那么多，他们俩每次都是带着手套，小心翼翼的用镊子夹上几个小离心管，一管一管的做，我们过去参观，还总让我们躲远点，生怕我们污染了他们的样品似的，不过他们的成功率好像也不比我们高多少。

几年后，我也成了PCR的大拿，开始带小师弟师妹。我才发现原来PCR对于生手来说有时候还挺难的呢。曾经我带过两个高中生，我就只交他们做PCR，同样的东西，我把它们加进管子里，实验就是成功的，让那两个高中小孩往里一加，PCR就什么都扩增不出来，原因让你都无从查起。我还带过两个大二的学生，也是这样呢。后来，我发现了，原来是他们用移液枪的时候太小心了，小心到样品总是加不进PCR管里就又粘在枪头上带了出来。后来，慢慢的，到他们都要走的时候，终于PCR可以做成了。

回想回想，实验真是欺生呢，你刚开始做的时候，总是失败，做多了，成功了，再想失败都难呢！

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zsj201204

第1楼2012/11/24

楼主写了好几篇这个类型的啊

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nkwinter

第2楼2012/11/24

呵呵，这个类型的快完了，以后写点别的，主要是最近很闲，没事灌灌水玩

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chr0mat1n

第3楼2012/11/27

做PCR最重要的就是加完样以后一定要换枪头，有一次我做的急，直接不换枪头就吸下一个，直接一管的DNTP宣告报废。
教训惨痛啊。
PCR就是要细心，只要你引物不错，加样正确，丢机器里面出结果不难。
还有就是要防止EB，跑胶的地方都会大书特书的。

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