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如果空走没有杂质，连柱子后又有杂质！（柱子是今天新买的呀！郁闷）改怎么办？

only-one

2006/06/02

液相色谱（LC）

梯度洗脱的时候在编辑时间程序的过程中会有要求吗？
A：0.02mol/l磷酸二氢钾
B：0.02mol/l磷酸二氢钾：乙腈＝20：80
时间程序：
0-1min A:B=95:5
1-20min A:B=59:41
20-21min A:B=40:60
21-30min 60%B等度
30-35min A:B=95:5
这样跑会有问题吗？
大概在24min时出现杂质，无论进样，还是空走都会有！
如果是：柱子有问题－－－柱子今天新买的，有杂质
混合池有问题－－－不带柱子空走，没有杂质
溶剂有问题------空走没杂质
那还会哪有问题呢？
谢谢赐教！！！！！！！！！

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tianru的爸爸

第1楼2006/06/02

如题，柱子里有杂质。柱子用流动相B清洗至系统紫外吸收平稳，再用。

0

制备液相

第2楼2006/06/03

新柱子一般读是用甲醇保存的,你所用的流动相洗脱能力不一样啊,所以,肯定是有杂质的.
用纯溶剂好好冲,然后走空梯度.
再有你的进样口清洗,是不是进样阀污染了哈?

0

xjtutfl

第3楼2006/06/03

可不可以附上图谱？
only-one 发表: 梯度洗脱的时候在编辑时间程序的过程中会有要求吗？
A：0.02mol/l磷酸二氢钾
B：0.02mol/l磷酸二氢钾：乙腈＝20：80
时间程序：
0-1min A:B=95:5(水相比例大，对色谱柱不好，且时间只有1min，好像没什么作用)
1-20min A:B=59:41
20-21min A:B=40:60（1min不能充满整个系统，对接下来的等度洗脱来说，前几分钟不是等度）
21-30min 60%B等度
30-35min A:B=95:5（这步是什么作用？有样品在这洗脱么？）
这样跑会有问题吗？（比例切换尽量不要太突然）
大概在24min时出现杂质，无论进样，还是空走都会有！（空走是不是进空白样品还是进样量为零？如果有进样这个动作，请排查进样针是不是污染了。）
如果是：柱子有问题－－－柱子今天新买的，有杂质（色谱柱使用前有没有冲洗过，如果没有，还是得怀疑）
混合池有问题－－－不带柱子空走，没有杂质（没有问题）
溶剂有问题------空走没杂质（没有问题）
那还会哪有问题呢？
谢谢赐教！！！！！！！！！

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