雾非雾
第1楼2013/01/16
这是个很老的方法,以前还真没看到过,不过您不用这么麻烦,用多残留一齐分析法就可以做涕灭威及其二个代谢物,我们这三个都是用LCMS检测的。
花生的做过,用C18除油,回收很好。花生油和棉籽油可能要用GPC+SPE净化才行。
DeeperBlue
第3楼2013/01/17
雾版说的是日本肯定列表制度的一齐分析法吧。
下面的方法来自日本肯定列表制度的细分分析法。给楼主参考。
涕灭威、乙硫甲威、杀线威、甲萘威、抗芽威、仲丁威和恶虫威检测方法
1.分析目标化合物
农药成分物质 分析目标化合物
涕灭威 涕灭威
乙硫甲威 乙硫甲威
杀线威 杀线威
甲萘威 甲萘威
抗芽威 抗芽威
仲丁威 仲丁威
恶虫威 恶虫威
2.仪器设备
带柱后衍生荧光检测器的高效液相色谱仪及液相色谱—质谱仪。
3.试剂
除下列试剂外,使用附录2所列试剂。
荧光发生液: 在10mg邻苯二甲醛和5μL 2-巯基乙醇中加入0.05mol/L 硼酸钠溶液至100mL。
磷酸缓冲液:约800mL水中加入1.75g氢氧化钠和11.7g磷酸二氢钠,溶解后,加水至1,000mL。
4.标准品
涕灭威:含涕灭威99%以上,熔点为98℃~100℃。
乙硫甲威:含乙硫甲威99%以上,熔点为33℃~34℃。
杀线威:含杀线威99%以上,熔点为100℃~102℃。
甲萘威:含甲萘威99%以上,熔点为138℃~140℃。
抗芽威:含抗芽威99%以上,熔点为90℃~91℃。
仲丁威:含仲丁威98%以上,熔点为32℃。
恶虫威:含恶虫威99%以上,熔点为129℃~130℃。
5.试验溶液的制备
a 提取方法
① 谷类、豆类、水果、蔬菜、种子类、末茶和啤酒花
谷类、豆类和种子类:将样品粉碎,通过420μm 标准网筛后,称取其10.0g,加入20mL水,放置2小时。
水果和蔬菜:准确称取约1kg样品,必要时定量加入适量的水,搅碎混合均匀后,称取相当于20.0g样品的量。
末茶和啤酒花:称取20.0g样品。
加入200mL丙酮,搅拌3分钟后,用涂布1cm 厚硅藻土的滤纸,抽滤至磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物,加入100mL丙酮,搅拌3分钟后,按上述同样操作,滤液合并于减压浓缩器中,40℃以下浓缩至约20mL。
将浓缩液转移至预先加入200mL 5%氯化钠溶液和100mL二氯甲烷(特级)的500mL分液漏斗中,用振荡器激烈振荡5分钟后,静置,二氯甲烷层移入500mL三角瓶中。水层中加入100mL二氯甲烷(特级),按上述同样操作,合并二氯甲烷层于上述三角瓶中。加入适量的无水硫酸钠,不时振摇、混合,放置15分钟后,过滤至磨口减压浓缩器中。再用50mL二氯甲烷(特级) 洗涤三角瓶,以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物,重复操作3次。合并洗涤液于减压浓缩器中,40℃以下浓缩约1mL,在室温下通氮气进一步吹干。
残留物中加入25mL正己烷和30mL正己烷饱和乙腈溶解,转移至100mL分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5分钟后,静置,乙腈层移入200mL分液漏斗中。正己烷层中加入30mL正己烷饱和乙腈,按上述同样操作,重复2次,合并乙腈层于上述分液漏斗中。加入50mL乙腈饱和正己烷,用振荡器激烈振荡5分钟后,静置,乙腈层转移至磨口减压浓缩器中,40℃以下浓缩至约1mL,在室温下通氮气进一步吹干。残留物中加入甲醇溶解,准确至2mL。
②末茶以外的茶
将9.00g样品浸泡于540mL 100℃水中,室温下放置5分钟后,过滤,移取360mL冷却的滤液于500mL三角瓶中。加入4mL饱和乙酸铅溶液,振荡、混合10秒钟后,用涂布1cm 厚硅藻土的滤纸抽滤,滤液移入1,000mL分液漏斗。再用50mL丙酮洗涤上述三角瓶,以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物。合并洗涤液于上述分液漏斗中,加入100mL乙醚和100g氯化钠,用振荡器激烈振荡5分钟后,静置,将乙醚层移入300mL三角瓶。水层中加入100mL乙醚,按上述同样操作,合并乙醚层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠,不时振荡、混合,放置15分钟后,过滤至磨口减压浓缩器中。再用30mL乙醚洗涤三角瓶,以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物,重复操作3次。合并洗涤液于减压浓缩器中,40℃以下浓缩至约1mL,在室温下通氮气进一步吹干。残留物中加入甲醇溶解,准确至2mL。
b 净化方法
取0.3mL a 提取方法所得的溶液,加入3mL稀盐酸,缓缓摇匀后,用孔径0.45μm的膜滤器过滤,此为试验溶液。
6.操作方法
a 定性试验
① 涕灭威、乙硫甲威、杀线威、甲萘威、仲丁威和恶虫威的试验
按照下列操作条件进行试验。试验结果必须与同样操作条件下标准品的结果一致。
操作条件
柱填充剂:十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒径5μm)
柱: 内径3.9mm、长150mm 不锈钢管。
柱温: 40℃
检测器: 激发波长260nm ,发射波长445nm
流动相:A:四氢呋喃;B:水;C:甲醇。调整流速使涕灭威约12 分钟流出。
浓度梯度: 输送水:甲醇(22:3)混合溶液0.1分钟后,浓度梯度从A:B(1:9)到(3:7)运行19.9 分钟。再输送四氢呋喃:水(3:7)混合溶液10分钟后,输送水:甲醇(22:3)混合溶液10 分钟。
水解槽: 流动相中,注入0.05mol/L 氢氧化钠溶液。保持一定的注入量。
水解槽温度: 80℃
荧光反应槽:流动相中,注入荧光发生液。保持一定的注入量。
② 抗芽威的试验
按照下列操作条件进行试验。用5.试验溶液的制备中a 提取方法所得的溶液作为试验溶液,试验结果必须与同样操作条件下标准品的结果一致。
操作条件
柱填充剂:十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒径5μm)
柱: 内径4.0--4.6mm、长250mm 不锈钢管。
检测器: 激发波长312nm ,发射波长382nm
流动相:水:甲醇:磷酸缓冲液(1:7:2)混合溶液。调整流速使抗芽威约5分钟30秒钟流出。
b 定量试验
根据与a 定性试验相同的操作条件下所得试验结果,峰高法或峰面积法定量。
c 确证试验
按照以下操作条件,进行气相色谱--质谱仪测定。用5.试验溶液的制备中a 提取方法所得的溶液作为试验溶液,试验结果必须与标准品的一致。此外,必要时用峰高法或峰面积法进行定量。
操作条件
柱:内径0.25mm,长30m石英毛细管,涂有0.25μm厚气相色谱用5%苯基--甲基硅酮,老化。
柱温:60℃保持2分钟,此后毎分钟升温15℃。到180℃后保持3分钟。再毎分钟升温8℃,到210℃后,保持2分钟。再以毎分钟升温5℃,到225℃后,毎分钟升温25℃,到280℃后,保持5分钟。
进样器温度:250℃
进样方式: 不分流
气体流量:用氦气作载气,调整流速使涕灭威约5分钟流出。
7.定量限
涕灭威: 0.005 mg/kg;
乙硫甲威: 0.005 mg/kg;
杀线威: 0.005 mg/kg;
甲萘威:无记载;
抗芽威: 0.005 mg/kg;
仲丁威:0.01 mg/kg;
恶虫威: 0.005 mg/kg