请教：氨基化合物的HPLC

你好，你要测定化合物的pH值应该显弱碱性，而你第二次所用流动相为酸性，这样的话，样品就会离子话，峰形什么应该不好吧！

个人觉得此化合物在酸性下，做的比较准。虽然化合物呈弱碱性，但在酸性条件会酸化，对于搂主说的不完全质子化，可能性不大。进入色谱柱样品是非常少的。如果对此方法没有十分把握，可以去做个核磁，90% 与60%在核磁上是十分明显的。
如果楼主的HPLC有DAD检测器，你可以做个全波段的扫描。看看这两个峰的三维吸收的峰形如何。
也可以用DAD监测器软件中检测90%那个峰的纯度。如果这峰的各点的全波段的紫外吸收峰形中有不同的峰形，那说明此峰n没有分离。