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关于lc-msms 实验后清洗

液质联用(LCMS)

  • 刚刚接触LC-MSms,有许多疑问。以前只用过正相柱和两相均为有机溶剂的液相色谱

    现在用岛津20+ab4000, 柱子是反相柱,流动相是0.1%甲酸水溶液和乙腈。

    每次做完实验后要冲洗柱子和管路,

    1) 需要做空白样来看是否有残留么?

    2) 是不是应该先使用纯水先冲洗,再用纯有机相冲洗?

    3) 可以使用纯乙腈作为有机相进行冲洗么?还是需要换成甲醇?

    4) 冲洗完毕,需要将体系调成什么样的比例用于保存柱子?

    问题比较杂,比较初级。谢谢回答!

    对了,还有一个问题,我们的去离子水是买来的,大量的,这样,每次做实验前,水相洗脱剂是不是只用过滤一下?
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  • sukiliang

    第1楼2013/02/25

    1) 需要做空白样来看是否有残留么?
    直接用有机相比水相来冲洗就行了,如果有盐的话建议冲洗时间长一点,然后慢慢梯度冲洗,建议加大柱子的温度!
    2) 是不是应该先使用纯水先冲洗,再用纯有机相冲洗?
    某些柱子是不能用100%的纯水冲洗的,我们培训说最起码要有5%的有机相
    3) 可以使用纯乙腈作为有机相进行冲洗么?还是需要换成甲醇?
    不需要,你一般用什么有机相就用哪种冲吧
    4) 冲洗完毕,需要将体系调成什么样的比例用于保存柱子?
    调成初始流动相就可以了吧!
    问题比较杂,比较初级。谢谢回答!

    对了,还有一个问题,我们的去离子水是买来的,大量的,这样,每次做实验前,水相洗脱剂是不是只用过滤一下?

    我们的水相是用屈臣氏的!

    以上均为个人意见仅供参考

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  • guten

    第2楼2013/02/25



    谢谢!!!

    sukiliang(sukiliang) 发表:1) 需要做空白样来看是否有残留么?
    直接用有机相比水相来冲洗就行了,如果有盐的话建议冲洗时间长一点,然后慢慢梯度冲洗,建议加大柱子的温度!
    2) 是不是应该先使用纯水先冲洗,再用纯有机相冲洗?
    某些柱子是不能用100%的纯水冲洗的,我们培训说最起码要有5%的有机相
    3) 可以使用纯乙腈作为有机相进行冲洗么?还是需要换成甲醇?
    不需要,你一般用什么有机相就用哪种冲吧
    4) 冲洗完毕,需要将体系调成什么样的比例用于保存柱子?
    调成初始流动相就可以了吧!
    问题比较杂,比较初级。谢谢回答!

    对了,还有一个问题,我们的去离子水是买来的,大量的,这样,每次做实验前,水相洗脱剂是不是只用过滤一下?

    我们的水相是用屈臣氏的!

    以上均为个人意见仅供参考

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  • hujiangtao

    第3楼2013/02/25

    应助达人

    一般不要用纯水相冲洗

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  • steven_sela

    第4楼2013/02/25

    不是你那机器的配置,不过我这边安捷伦的一般柱子冲完都把柱子卸了接个二通,用乙腈或甲醇:水=7:1~9:1的比例再冲一下系统。具体比例可以根据你测的样品来定。一般2ml/min冲个10min左右就可以了。
    反相柱封存一般都是高比例的有机相:水,也可以用纯甲醇来封存。具体的你可以参考一下柱子里的说明书或者它出厂的检测报告。

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  • hanchunhuily

    第5楼2013/03/06

    一般液相柱用水-乙腈(8:2)左右冲洗25倍柱体积以上就可以换成水-乙腈(10:90)冲洗20倍柱体积,保存就可以了,一般液质还是封存在乙腈-水体系里,乙腈粘度比较低。常规高效液相色谱封存在甲醇-水中比较好。乙腈有时会让柱塞杆或进样器黏住。洗柱子时一般不用纯水或纯有机相,纯水对反相柱损伤较大,纯有机相对于使用过缓冲盐的柱子容易使未洗净的盐析出,堵塞。

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