高效液相色谱的峰分不开

第一针没分开，也许是系统没平衡好；超声时间太长是否发生反应。

现在是用的40min的，前面有一个峰与我要的峰分不开了，后面的峰分开了

1，流动相比例
2，色谱柱
3，系统平衡，温度等

个人感觉还是系统平衡的时间不够。前段时间我也遇到过类似问题，延长的6分钟的平衡时间久解决问题了。

应助达人

两次提取的时间不同，进样后保留时间有明显变化吗，分不开的那两峰的峰高有没有明显变化？

两种物质结构相近极性相近就容易分不开，还与色谱系统的状态有关，柱效问题等，超声处理是个破坏过程。

没做过，但从你的流动相条件来看，有机相比例已经很低了，可以考虑在水相中加些缓冲盐来改善分离效果。如果分离度不高的话，耐用性上面也很难过关的

每次进样前，要保证系统已达到平衡，最好连续进两次，看看重复性怎么样

可以试试调一下流动相比例啊