液质联用，负离子模式下，对照品是一种三氟乙酸盐怎么办？

应助达人

不是说三氟乙酸盐不能用，如果样品里面有很低含量的三氟乙酸，问题不大。
比如样品上机浓度一般在mg/L的数量级，进样量在10ul的数量级，这个没有问题的。最怕的是流动相里面有三氟乙酸。

很奇怪，既然样品是在负离子模式下做的，说明样品是酸性或弱酸性的物质，对照品怎么会是三氟乙酸盐呢，钠盐钾盐还差不多。

我也觉得奇怪，因为对照品的结构式上，没有标出和哪个集团形成的盐如图，是不是和羧基？还是以氢键或离子的形式结合的，

- -！看完专家的话，我想起之前为了要做出氨基糖苷类还在流动相里加入七氟丁酸！虽然是按标准加入七氟丁酸，但是到最后都是没做出来！

应助达人

这是一个两性物质，既有碱性基团氨基，也有酸性基团羧基和酚羟基。所以，既可以与强碱（氢氧化钠、氢氧化钾等）成盐，也可以与强酸（盐酸、硫酸等）成盐。

有可能是与强碱成盐不稳定（容易被氧化？），所以对照品选择了与强酸成盐。不过还是很好奇那么多种酸，为什么偏偏选择了三氟乙酸。

应助达人

你这里用的七氟丁酸应该是离子对试剂。如果没猜错的话，用的色谱柱应该是C18（ODS）之类的吧。

这样的方法（离子对色谱法）在做一些碱性亲水性物质的时候，如果只有C18柱，确实是唯一的选择。比如三聚氰胺的HPLC紫外检测的国标方法，只不过更常见的离子对试剂是己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠之类的，七氟丁酸比较少见。

但是如果是液质联用，离子对色谱法里面的离子对试剂与ESI离子源是不兼容的。

如果现在你还做氨基糖苷类的物质，建议试试HILIC色谱柱，这样的分离方法兼容质谱检测。

是的丫，我们只有C18的柱子！

我也准备采购HILIC色谱柱的，请问老师如果用了HILIC色谱柱以后，流动相继续用0.1%甲酸和0.1%甲酸乙腈应该没问题吧？还有用HILIC色谱柱的话流动相应该怎么设置梯度？

我由开始只用C18的柱子重来没用过其他柱子！

是的丫，我们只有C18的柱子！

我也准备采购HILIC色谱柱的，请问老师如果用了HILIC色谱柱以后，流动相继续用0.1%甲酸和0.1%甲酸乙腈应该没问题吧？还有用HILIC色谱柱的话流动相应该怎么设置梯度？

我由开始只用C18的柱子重来没用过其他柱子！[/quote]

亲水柱用甲酸没有问题，问题是用甲酸做氨基糖苷类的药物，效果不是很好。。。。

亲水柱用甲酸没有问题，问题是用甲酸做氨基糖苷类的药物，效果不是很好。。。。[/quote]

学习了，请问老师应该加入什么来做比较合适呢？很迷茫，马上要做方法比对了，不知道该怎么做！

学习了，请问老师应该加入什么来做比较合适呢？很迷茫，马上要做方法比对了，不知道该怎么做！[/quote]

唉，我倒现在也没做出来，基本上所有的方法不是使用七氟丁酸就是用三氟乙酸，曾经用三氟乙酸做过，仪器冲了一个周，负离子感度才恢复