“已知解离常数预测出峰顺序”答案大揭晓！！！

呵呵，我能猜得完全相反也不容易呀……

我还是想争辩一下。我从等电点来考虑：在等电聚焦试验下，氨基酸应该停留在等电点的位置，也就是说在pI值时在电场的作用下是不移动的，这个时候认为氨基酸是中性的（把氨基酸作为一个整体考虑，不论个别基团）。那么当pH大于pI时，这是碱式解离受到抑制，酸式解离收到促进，解离产物带负电，pH-pI值越大，解离越完全，这个要具体查解离曲线了。这里我们假定当pH-pI大于3时就完全解离了，这个时候应该带上完全的负电，出峰最慢。在pH相同的条件下，pI值应该越小，pH-pI值越大，解离越完全，出峰越慢。（电渗流都是一样的，最终的有效淌度与解离度和绝对淌度成正比，这在陈义的书中有介绍），那么直接考虑pI值应该是越大出峰越快了。至于绝对淌度，在速度平衡的情况下，qE=6πηrV，并没有显示和质量有关，而是和场强、电荷、溶液黏度、离子半径有关，这从平衡状态下没有加速度就和质量关系不大来考虑也是合理的。至于质量，我认为需要从吸附、离子云效应考虑的时候才有关，这个大多数情况下大家都不考虑了。也因为这样，pI值在6左右的氨基酸应该主要跟离子半径有关，因为溶液黏度和场强都是相同的，而这部分氨基酸只带一个氨基和羧基，都解离完全，所带电荷都接近，所以出峰容易与预测产生偏差，分不开的可能性更大些。

这里是把氨基酸作为一个整体来考虑，分开来考虑的话pI值接近的顺序可能会有差别，但其他的应该差别不大。

不过话又说回来，有时候好像真的和质量是有关系的，真是叫人糊涂啊

个人见解，欢迎拍砖。

wy2007很enlighten啊，说的很有道理，我只关注了荷质比而忽略了等电点。原帖里面自己给网友的提示其实也有提示到等电点的，可是自己在整理这个答案的时候偏偏自己给忘了。

不过，物质的出峰顺序机理真的是很复杂，除了你所关注的等电点问题，荷质比是一定不能忽略的。其实捷克Charles University的一个组早在05年就已经推出了一款叫做peakmaster的软件，只要输入buffer的相关参数，用这个软件就能够模拟出对应的谱图来。其中离子半径也是其中的一个重要参数。

影响出峰顺序的因素很多，wy2007所说的都在理。关键看什么因素在起主要作用。
如果谁有兴趣的话可以做一下实验验证就可以知道，我们所提出的那么多依据当中，到底哪个因素在起主导作用。
我所提出的这个假想的条件如果是UV detector的话根本做不了的，因为这些氨基酸没有紫外响应，要衍生。衍生后成了别的物质，上面所给的参数全部不能用了。用电导致化学发光或质谱等检测器的话，倒是有可能做到。

应助达人

学习了，辛苦了