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质粒房工作守则
省部重点实验室
2013/06/16
私聊
生命科学仪器综合讨论
名称:质粒房工作守则
关键词:质粒
目的:操作规范化,减少污染!
主体内容:一、 常规操作
1、 进入质粒房须换专用工作服,自己的白大衣或厚外套可脱在门外的衣帽架上;
2、 工作时尽量避免交谈,无实验时少在其中逗留;
3、 请勿随意调节培养箱和摇床的温度,以免对他人实验造成影响。如实验确实需要调动温度,应公告他人;
4、 超净工作台勿用酒精擦洗,使用前可用紫外灭菌10分钟,使用后清理干净;
5、 枪头、废液请分开放置,实验完成后枪头倒于垃圾桶,废液倒于洗手间的卫生专用池,并将垃圾杯冲洗干净;
6、 做完实验后,试剂用品等放回原处,台面及时清理干净;
7、 用过的培养瓶、培养皿和无用的菌液等请及时清理;
8、 感受态细胞和培养液等常用试剂快用完时请及时通知值日生。
二、 值日生工作职责
1、 每周值日生时间从周六开始,至下周五结束;
2、 在周六周日或之前准备好灭菌的枪头、离心管(包括0.5、1.5、10和50ml)、培养皿和培养基(一般固体200ml、液体300ml)等常用物品;
3、 及时制作酒精棉球,给酒精灯添加酒精,及时清理垃圾;
4、 及时做好公用试剂的配制工作,如50%甘油、70%乙醇、Solution I、II、III、10N NaOH和10%SDS等;
5、 每周督促他人清理冰箱中各自废弃物品,每周全面清理打扫质粒房一次,紫外灭菌一次(30分钟)。
三、 常用试剂的配制
1、 Solution I:50mM Glucose,25mM Tris-HCL(pH 8.0),10mM EDTA(pH 8.0),灭菌后存于4℃;
2、 Solution II:0.2N NaOH,1% SDS(现配现用);
3、 Solution III:5M 乙酸钾 60ml,冰乙酸11.5ml,加水到100ml即可;
4、 LB:25g LB粉加水1000ml,固体LB加入1.5-1.7g琼脂粉/100ml即可,分装灭菌,4℃保存;
5、 Ampi:配成100mg/ml的母液,存于-20℃,使用浓度为100ug/ul;
Kana:配成100mg/ml的母液,存于-20℃,使用浓度为50ug/ul。
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