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新人求助!食醋中苯甲酸回收率低

  • 母鸡哥哥
    2013/06/26
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 向各位老师请教:我做食醋中苯甲酸,30g样品加了4000ug,但是回收率只有70%多一点,很着急,请大家指点指点

    1、我用的是乙酸铵(0.02mol/L):甲醇=95:5的流动相,配乙酸铵的时候没加冰乙酸,影响大么?

    2、我将食醋稀释10倍,然后调PH接近中性后除蛋白,离心,过滤,进样。调PH有必要么?调过之后是不是苯甲酸都变成苯甲酸钠了啊?

    3、标准品是1000ppm的苯甲酸标准溶液用水稀释成的浓度系列,最小5ppm,最大100ppm

    4、我也用标准加入法计算了,算出的食醋(稀释10倍)本底浓度80多个ppm(调过PH的),没调PH的也做了一次,只有70多个ppm

    请各位帮我分析一下原因,拜托了!!!!!!!
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  • 老多_小多

    第1楼2013/06/26

    乙酸铵流动相没必要加乙酸,不管你是否调PH,苯甲酸钠还是电离为苯甲酸

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  • 母鸡哥哥

    第2楼2013/06/26

    好的,谢谢,那大家能帮我分析分析怎么回收率这么低啊?

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  • tiantaishan

    第3楼2013/06/26

    2、我将食醋稀释10倍,然后调PH接近中性后除蛋白,离心,过滤,进样.

    此过程是离心后是否定容(必要时定容体积为5%甲醇的量)??不用调节PH值,标准中的沉淀剂是乙酸锌和亚铁氰化钾,沉淀剂就含有比较高的乙酸,调节没有必要。

    离心后可以不用过滤,离心转速要在3000r/min以上,大致5-10分钟;加标精确控制体积。

    另外,加标的浓度稍微有点低(特别是国产仪器),出峰要分离完全,不能和样品基质有干扰。

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  • 母鸡哥哥

    第4楼2013/06/27

    谢谢楼上的老师。有些地方还是不明白
    楼上老师说“离心后定容”,那我刚开始就不用稀释了,直接除蛋白、离心、移出液体定容,是这样吗?
    老师说的(必要时定容体积为5%甲醇的量),是不是用流动相定容,还是用5%甲醇95%水定容?
    离心后不用过那种一次性的滤头啊?

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  • 母鸡哥哥

    第5楼2013/06/27

    谢谢之前回答的两位老师。
    今天又重新加标做了。95%左右。之前可能是加标不准确或者均一性差。但是保留时间提前了接近1min。5分钟左右提前到4分钟左右,郁闷!!困惑!!
    我用的是乙酸铵(0.02mol/L):甲醇=95:5的流动相,0.8ml/min

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  • houjjun

    第6楼2013/06/27

    70%也还算可以,是不是过滤时等前处理环节有较大的损耗了

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  • tiantaishan

    第7楼2013/06/27

    具体操作是稀释10倍后,加入沉淀剂,摇匀(不用调PH),然后定容。取一部分溶液离心(当然1万转/min最好,离心5min).去上层溶液直接测定(可以不用过滤,当然UPLC必须过滤)。

    保留时间提前可能是柱子没有平衡好或有气泡,当然也有可能配置的流动相浓度有差异,不完全一样(液相条件一样的话)

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  • 母鸡哥哥

    第8楼2013/06/28

    非常感谢楼上两位的回答!

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