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宝刀未老，光辉岁月，雷贝拉唑钠肠溶片有关物质方法学部分

东风恶

2013/06/27

私聊

厂商论坛

项目：有关物质（3.2.P.5.2.3）

检查方法：HPLC法

试验条件：

色谱柱（柱长：250mm，内径：4.6mm，填料：C₁₈，填料粒径：5μm）

月旭色谱柱：SN:W10212097；PN：weL518425。

UV检测器（检测波长：290nm）

柱温：30℃

流动相：0.05mol/L磷酸盐溶液(用0.05mol/L磷酸二氢钾溶液调节0.05mol/L磷酸氢二钠溶液pH值至7.0)-甲醇(40:60)

流速：1.0ml/min

运行时间：约30min

具体试验操作：取含量测定项下的细粉适量(约相当于雷贝拉唑钠50mg)，精密称定，置50ml量瓶中，加0.05mol/L氢氧化钠溶液20ml，超声溶解，放冷至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，在3000rpm下离心10分钟，取上清液作为供试品溶液。精密量取供试品溶液1ml，用0.05mol/L氢氧化钠溶液-甲醇(2:3)稀释至100ml，作为对照溶液。精密量取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20%～25%；再精密量取供试品溶液与对照溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分色谱峰保留时间的2倍。对照溶液中的主峰面积As、供试品溶液中各杂质的峰面积Ai均通过自动积分测定，以各杂质峰面积与对照溶液主峰面积的比值计算得出各杂质的含量，总杂为各杂质和。

计算公式：

各杂质的量（%）=Ai/As

杂质总量（%）=∑i

3.2.P.5.3.2 有关物质

因本品10mg和20mg规格处方一样，有关物质研究试验主要以规格为10mg样品进行。

有关物质检查方法验证概要

项目	验证结果
流动相选择	0.05mol/L磷酸盐溶液(用0.05mol/L磷酸二氢钾溶液调节0.05mol/L磷酸氢二钠溶液pH值至7.0)-甲醇(40:60)。
专属性	各破坏条件下，产生的杂质与主成分能够有效分离，主成分峰未检出不纯物。
线性和范围	无相关研究内容。
定量限、检测限	雷贝拉唑钠的保留时间大约为9.3分钟，在±1分钟的时间范围计算基线噪音约为0.027，当S/N≒3时,雷贝拉唑钠的检测浓度为0.0125μg/ml,检测限为0.125ng,当S/N≒10时,定量限浓度为0.050μg/ml,定量限为0.50ng,
准确度	无相关研究内容。
精密度	主峰面积和保留时间精密度RSD值（n=6）均小于2.0%。
溶液稳定性	室温放置8小时稳定性较好，主峰面积的RSD值为0.16%，归一化含量RSD值为0.13%，均小于2.0%。
耐用性	流动相成分比例±2%；检测波长285nm～290nm；柱温为室温25℃～35℃，流速为1.0±0.05ml/min，pH值为7.0±0.2，磷酸盐浓度0.05±0.002mol/L。
有关物质检查	上市品和自制品均符合规定。

3.2.P.5.3.2.1 流动相选择

参照新药转正标准第73册收载的雷贝拉唑钠肠溶片质量标准WS1-(X-117)-2006Z有关物质检查项（检测波长290nm）、雷贝拉唑钠肠溶片进口药品质量标准（JX19990087）有关物质检查项检，本品有关物质检查项流动相同含量测定，即0.05mol/L磷酸盐溶液(用0.05mol/L磷酸二氢钾溶液调节0.05mol/L磷酸氢二钠溶液pH值至7.0)-甲醇(40:60)，流动相选择试验结果见含量测定流动相选择试验结果。

3.2.P.5.3.2.2方法专属性(色谱图见附件26～62)

因本品10mg和20mg规格处方一致，专属性试验以10mg规格进行研究。

（1）溶剂和空白辅料试验(色谱图见附件26～29)

本品有关物质测定供试液的溶剂为0.05mol/L氢氧化钠溶液-甲醇（2:3）。精密称取处方量辅料0.6001g，置50ml量瓶中，加0.05mol/L氢氧化钠溶液20ml，超声使溶解，放冷至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，在3000rpm下离心10分钟，取上清液作为供试品溶液，精密量取供试品溶液10µl注入液相色谱仪，记录色谱图。试验结果表明空白辅料对本品有关物质测定无干扰。

（2）未破坏样品对比试验(色谱图见附件30～33)

精密称取本品（规格：10mg，批号：20100801）0.6549g，置50ml量瓶中，加0.05mol/L氢氧化钠溶液20ml，超声使溶解，放冷至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，在3000rpm下离心10分钟，取上清液作为供试品溶液，精密量取供试品溶液10µl注入液相色谱仪，记录色谱图。

以总峰数较多的210nm、290nm和254nm波长各峰保留时间列表，各峰以相对供试液主峰保留时间列表统计，在各波长处根据面积归一化法计算含量，自制品雷贝拉唑钠平均值为98.8282%，相对平均偏差为0.28%，各波长检出杂质个数为4个；试验结果表明各波长下含量差异不明显。

各波长下主峰与前后杂质峰分离度均大于1.5，理论板数均大于5000，拖尾因子约为0.9～1.5，主峰未检出不纯物，系统适用性良好。

试验结果见下表：

未破坏样品杂质情况

峰#	1	2	3	4	5
保留时间（min）	2.66	3.059	5.208	7.482	9.439
相对保留时间	0.28	0.32	0.55	0.79	1.00
210nm（%）	0.126	0.1081	0.0962	1.1273	98.5423
290nm（%）	-	0.0918	-	1.2049	98.7032
254nm（%）	-	-	-	0.7608	99.2392
分离度	-	1.757	9.291	7.494	5.244
拖尾因子	0.845	1.353	1.077	1.076	1.053
理论塔板#	1837.636	3520.617	6606.3	7290.177	9105.496
最大λ（nm）	266	246/276	205/245	287	209/283

备注：各峰保留时间以杂质峰较多的210nm、290nm波长为主统计；“-”为未检出有关物质或不能计算。

（3）强光破坏试验(色谱图见附件34～37)

取本品细粉（规格：10mg，批号：20110401）置照度4500±500Lx光照箱中，放置150h后，精密称取0.6588g，置50ml量瓶中，加0.05mol/L氢氧化钠溶液20ml，超声使溶解，放冷至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，在3000rpm下离心10分钟，取上清液作为供试品溶液，精密量取供试品溶液10µl注入液相色谱仪，记录色谱图。

以总峰数最多的210nm和290nm波长各峰保留时间列表，其余波长下各峰积分以相对主峰保留时间列表进行统计。各波长下主峰与前后杂质峰分离度均大于1.5，理论板数均大于5000，拖尾因子约为0.9～1.2，系统适用性良好，主峰未检出不纯物。

样品经强光照射后各波长检出杂质个数共计6个；在210nm、290nm和254nm波长处根据面积归一化法计算，平均含量为97.9009%，相对平均偏差为0.21%，试验结果表明各波长下含量差异不明显，较未破坏样品强光破坏约1%，本品在强光照射条件下较为稳定。结果见下表。

强光破坏样品杂质情况

峰#	1	2	3	4	5	6	7
保留时间（min）	3.054	3.257	3.953	5.709	6.192	7.199	9.134
相对保留时间	0.33	0.36	0.43	0.63	0.68	0.79	1.00
210nm（%）	0.2759	0.5703	0.128	0.0786	0.1375	1.218	97.5916
290nm（%）	0.16	0.2205	0.1653	0.0837	-	1.3299	98.0406
254nm（%）	0.2662	0.6454	-	-	0.2056	0.8122	98.0706
分离度	-	0.886	3.042	6.893	1.771	3.214	5.453
拖尾因子	-	-	0.854	1.172	1.195	1.112	1.09
理论塔板#	2379.476	3987.047	3947.843	7859.452	7384.646	7232.524	9702.201
最大λ（nm）	248/283	249	301/292/244	283/264/377	206/249	287	207/282

备注：各峰保留时间以杂质峰较多的210nm、290nm、254nm波长为主统计；“-”为未检出有关物质或不能计算。

（4）高温破坏试验(色谱图见附件38～41)

精密称取本品（规格：10mg，批号：20100801）0.6567g，置50ml量瓶中，加0.05mol/L氢氧化钠溶液20ml，超声使溶解，放冷至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀， 60℃水浴放置20min，放冷至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，在3000rpm下离心10分钟，取上清液作为供试品溶液，精密量取供试品溶液10µl注入液相色谱仪，记录色谱图。

以总峰数最多的210nm、290nm和254nm波长各峰保留时间列表，各峰积分以相对主峰保留时间列表进行统计。各波长下主峰与前后杂质峰分离度均大于1.5，理论板数均大于5000，拖尾因子约为0.9～1.2，系统适用性良好，主峰未检出不纯物。

样品经高温破坏后各波长检出杂质个数共计10个；在210nm、290nm和254nm波长处根据面积归一化法计算，平均含量为86.3201%，相对平均偏差为6.09%。试验结果表明各波长含量差异较明显。较未破坏条件，高温被破坏约为13%。结果见下表。

高温破坏样品杂质情况

峰#	1	2	3	4	5	6
保留时间（min）	2.619	2.788	3.13	6.362	7.568	9.584
相对保留时间	0.27	0.29	0.33	0.66	0.79	1.00
210nm（%）	3.1381	1.3563	0.1235	0.0971	1.0838	94.2012
290nm（%）	18.4139	-	0.438	0.0564	0.9933	80.0984
254nm（%）	12.1392	-	2.5436	-	0.6564	84.6608
分离度	-	0.669	1.706	14.076	3.689	5.416
拖尾因子	-	-	1.157	1.115	1.107	1.094
理论塔板#	1617.531	2125.215	6166.97	7204.525	7306.504	9657.418
最大λ（nm）	311	226/263/307	252	206/246	287	207/282

备注：各峰保留时间以杂质峰较多的210nm、290nm、254nm波长为主统计；“-”为未检出有关物质或不能计算。

（5）氧化破坏试验(色谱图见附件42～49)

精密称取本品（规格：10mg，批号：20100801）0.6303g，置50ml量瓶中，加30%的双氧水溶液3ml，于室温条件下放置1小时40分钟后，加0.05mol/L氢氧化钠溶液20ml，超声使溶解，放冷至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，在3000rpm下离心10分钟，取上清液作为供试品溶液，精密量取供试品溶液10µl注入液相色谱仪，记录色谱图。

以总峰数最多的210nm、290nm和254nm波长各峰保留时间列表，其余波长下各峰积分以相对主峰保留时间列表进行统计。各波长下主峰与前后杂质峰分离度均大于1.5，理论板数均大于5000，拖尾因子约为0.9～1.2，主峰未检出不纯物，系统适用性良好。

自制品经氧化破坏后各波长检出杂质个数共计10个；在210nm、290nm和254nm波长处根据面积归一化法计算含量为81.4975%，相对平均偏差为2.32%。试验结果表明各波长含量差异较明显。较未破坏样品，氧化破坏被破坏约为19%。结果见下表。

氧化破坏样品杂质情况

峰#	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11
保留时间（min）	2.936	3.138	3.419	3.549	3.999	4.241	5.584	6.107	6.282	7.478	9.441
相对保留时间	0.31	0.33	0.36	0.38	0.42	0.45	0.59	0.65	0.67	0.79	1.00
210nm（%）	-	0.3391	1.8783	0.828	1.5946	0.3247	0.5135	0.5983	0.2934	14.9764	78.6537
290nm（%）	0.1205	-	0.9193	-	0.4124	0.1231	0.0995	0.4279	-	16.0782	81.8191
254nm（%）	0.2792	0.1859	2.7772	-	0.5882	1.0845	0.2568	0.1743	-	10.6342	84.0197
分离度	-	-	0.532	0.491	1.879	1.156	4.39	1.192	0.183	1.352	5.024
拖尾因子	-	-	-	-	0.945	-	-	-	-	1.081	1.06
理论塔板#	238	3136	2458	6924	5588	3367	2459	313	7327	7655
最大λ（nm）	-	276/250	208/251	259	223/277 /338	246/330	260/282	278	-	287	207/283

备注：各峰保留时间以杂质峰较多的210nm、290nm波长为主统计；“-”为未检出有关物质或不能计算。

（6）强酸破坏试验(色谱图见附件50～58)

精密称取本品（规格：10mg，批号：20100801）0.5801g，置50ml量瓶中，加1mol/L盐酸溶液1.5ml，于室温条件下放置30min后，加0.05mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至中性，加0.05mol/L氢氧化钠溶液20ml，超声使溶解，放冷至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，在3000rpm下离心10分钟，取上清液作为供试品溶液，精密量取供试品溶液10µl注入液相色谱仪，记录色谱图。

以总峰数最多的210nm、290nm和254nm波长各峰保留时间列表，其余波长下各峰积分以相对主峰保留时间列表进行统计。各波长下主峰与前后杂质峰分离度均大于1.5，理论板数均大于5000，拖尾因子约为0.9～1.2，系统适用性良好，主峰未检出不纯物。

样品经强酸破坏后各波长检出杂质个数共计11个；在210nm、290nm和254nm波长处根据面积归一化法计算含量为79.3746%，相对平均偏差为6.48%。试验结果表明各波长含量差异较明显。较未破坏条件，强酸破坏约为20%。结果见下表。

酸破坏样品杂质情况

峰#	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12
保留时间（min）	3.316	3.586	4.080	4.732	5.129	6.320	7.310	8.548	9.290	11.466	14.045	21.165
相对保留时间	0.36	0.39	0.44	0.51	0.55	0.68	0.79	0.92	1.00	1.23	1.51	2.28
210nm（%）	1.2108	3.0614	-	2.2711	5.2035	4.4185	1.1391	0.5429	75.9839	0.3785	0.7272	5.0631
290nm（%）	0.6674	0.7963	0.2285	1.6037	0.7654	1.0644	1.3101	0.1359	87.0915	0.101	0.7949	5.4409
254nm（%）	1.4461	3.8796	-	1.2177	5.9988	5.6217	0.6933	0.6965	75.0483	0.5087	0.6245	4.2648
分离度	-	1.418	-	4.766	1.426	4.163	3.133	3.375	1.809	4.532	4.709	10.499
拖尾因子	1.282	1.309	-	-	-	1.18	1.104	1.032	1.089	1.043	1.022	1.023
理论塔板#	4465	5293	-	4441	5732	7039	7810	7175	8024	6998	10679	10852
最大λ（nm）	208/250 /317	208/251 /326	-	208/305 /254	207/251 /348	206/247	287	207/251	204/283	207/251	284/249	284/249

备注：各峰保留时间以杂质峰较多的210nm、290nm波长为主统计；“-”为未检出有关物质或不能计算。

（7）强碱破坏试验(色谱图见附件59～62)

精密称取本品（规格：10mg，批号：20100801）0.6541g，置50ml量瓶中，加6mol/L氢氧化钠溶液3ml，冰浴，加2mol/L盐酸溶液5ml，再慢慢调节pH值至中性，加0.05mol/L氢氧化钠溶液20ml，超声使溶解，放冷至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，在3000rpm下离心10分钟，取上清液作为供试品溶液，精密量取供试品溶液10µl注入液相色谱仪，记录色谱图。

以总峰数最多的210nm、290nm和254nm波长各峰保留时间列表，其余波长下各峰积分以相对主峰保留时间列表进行统计。各波长下主峰与前后杂质峰分离度均大于1.5，理论板数均大于5000，拖尾因子约为0.9～1.2，系统适用性良好，主峰未检出不纯物。

自制品经强碱破坏后各波长检出杂质个数共计4个；在210nm、290nm和254nm波长处根据面积归一化法计算，含量为98.3128%，相对平均偏差为0.22%。试验结果表明各波长含量差异不明显。较未破坏样品，强碱破坏约为2%。

结果见下表。

碱破坏样品杂质情况

峰#	1	2	3	4	5
保留时间（min）	3.132	4.932	6.353	7.59	9.611
相对保留时间	0.33	0.51	0.66	0.79	1.00
210nm（%）	-	0.1016	0.4201	1.1708	98.3076
290nm（%）	0.4908	0.1639	0.1009	1.2573	97.9871
254nm（%）	-	-	0.5578	0.7986	98.6437
分离度	-	-	4.935	3.623	5.56
拖尾因子	-	0.791	1.075	1.095	1.092
理论塔板#	-	6704.387	5722.093	7724.549	10196.93
最大λ（nm）	-	281	206/247	287	206/282

备注：各峰保留时间以杂质峰较多的210nm、290nm波长为主统计；“-”为未检出有关物质或不能计算。

（8）专属性试验杂质谱情况

以各破坏条件下杂质峰保留时间比进行列表统计，专属性试验结果统计显示：相对主峰保留时间为0.79为样品和其他破坏条件样品共有杂质，在强酸、酸碱、高温条件下破坏所产生的杂质数最多。结果见下表。

专属性杂质谱统计

试验项目	相对保留时间（RRT）
试验项目	0.28	0.29	0.33	0.36	0.39	0.42	0.44	0.51	0.55	0.63	0.68	0.79	0.92	1.00	1.23	1.51	2.28
未破坏样品	√	-	√	-	-	-	-	√	-	√	-	√	-	-	-
强光破坏样品	-	-	√	√	-	-	√	-	-	√	√	√	-	√	-	-	-
高温破坏样品	√	√	√	-	-	-	-	-	-	-	√	√	-	√	-	-	-
氧化破坏样品	-	√	√	√	√	√	√	-	√	√	√	√	-	√	-	-	-
酸破坏样品	-	-	-	√	√	-	√	√	√	-	√	√	√	√	√	√	√
碱破坏样品	-	-	√	√	√	-	√	√	-	-	√	√	-	√	-	-	-

备注：“√”为检出有关物质，“-”为未检出有关物质，相对保留时间为1.00的峰为雷贝拉唑钠主峰。

（9）专属性试验物料平衡

根据以上破坏条件，在210nm、290nm、254nm波长处进行统计各破坏条件检出的各色谱峰面积之和，强酸、氧化破坏质量平衡率差异较大，其他条件差异不大，结果见下表。

计算公式：

相对平衡率=×100%

专属性试验物料平衡统计

试验项目	称样量（g）	稀释倍数	总峰面积	主峰面积归一化法含量	总峰面积	平衡率
试验项目	称样量（g）	稀释倍数	总峰面积	主峰面积归一化法含量	与浓度比值	平衡率
未样品	0.6549	50	16515834	98.703%	1260943197	100.00%
强光破坏样品	0.6588	50	17553365	98.041%	1332222602	105.65%
高温破坏样品	0.6567	50	17352531	80.098%	1321191640	104.78%
氧化破坏样品	0.6303	50	14666784	81.819%	1163476440	92.27%
酸破坏样品	0.5801	50	13273905	87.091%	1144104896	90.73%
碱破坏样品	0.6541	50	16917104	97.987%	1293158844	102.55%

备注：“-”为未统计。

3.2.P.5.3.2.3本品中试样品和上市品杂质谱比较

采用紫外检测器（UV）对本品进行有关物质检测，根据相对雷贝拉唑钠主峰保留时间，在±0.03范围内归为同一杂质列表进行统计，结果如下：

相对于主峰保留时间为0.36、0.37、0.45、0.52、0.78、2.27为本品自制品和上市品共有杂质；相对于主峰保留时间为0.60、1.31、1.40为本品上市品特有杂质，相对于主峰保留时间为0.23、0.70、1.76为本品自制品特有杂质，其含量均小于0.2%，未超过超过鉴定限度（本品最大日剂量20mg）。上市品和自制品杂质面积归一化法含量差异不大，杂质个数相当，初步推测为上市品原料药不同和生产工艺和时间不同以及有关物质检测积分差异引起。上市品和自制品杂质统计结果见下表。

中试样品和上市品色谱图（UV 290nm）

批号	0.23	0.30	0.36	0.37	0.45	0.52	0.60	0.70	0.73	0.78	1.00	1.31	1.40	1.76	2.27
80674	-	√	√	√	√	√	√	-	√	√	√	√	-	√
20100801（10mg）	√	√	√	√	√	√	-	-	√	√	√	-	-	√	√
20100801（20mg）	-	√	√	√	√	√	-	√	√	√	√	-	-	√	√
20110201	-	-	√	√	√	√	-	-	√	√	√	-	-	√	√
20110202	-	-	√	√	√	√	-	-	√	√	√	-	-	√	√
20110203	-	-	√	√	√	√	-	-	√	√	√	-	-	√	√
20110204	-	-	√	√	√	√	-	-	√	√	√	-	-	√	√
20110205	-	-	√	√	√	-	-	√	√	√	-	-	√	√
20110206	-	-	√	√	√	√	-	-	√	√	√	-	-	√	√

3.2.P.5.3.2.4有关物质检查波长选定

参照雷贝拉唑钠原料药质量标准（试行）YBH11012004有关物质检查项（检测波长286nm）、新药转正标准第73册收载的雷贝拉唑钠肠溶片质量标准WS₁-(X-117)-2006Z有关物质检查项（检测波长290nm）、雷贝拉唑钠肠溶片进口药品质量标准（X20000036、X20000037）有关物质检查项检测波长（290nm）以及本品专属性试验结果，将检测波长选定为290nm。

3.2.P.5.3.2.5检测限与定量限(色谱图见附件63～70)

精密称取雷贝拉唑钠对照品0.0260g置25ml量瓶中，加0.05mol/L氢氧化钠溶液10ml，超声使溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试储备液，取供试储备液并用0.05mol/L氢氧化钠溶液-甲醇（2:3）逐级稀释，分别取10µl注入高效液相色谱仪，经测定，雷贝拉唑钠的保留时间大约为9.3分钟，在±1分钟的时间范围计算基线噪音约为0.027，当S/N≒3时,雷贝拉唑钠的检测浓度为0.0125μg/ml,检测限为0.125ng,当S/N≒10时,定量限浓度为0.050μg/ml,定量限为0.50ng,试验结果见下表。

检测限的确定

序号

峰高（mV）εmax

峰高（mV）

εmin

峰高（mV）

Δε

平均峰高（mV）

Δε

检测限（mV）

0.002

0.007

0.009

0.027

0.004

0.005

0.009

检测限验证浓度

序号	稀释倍数	浓度(µg/ml)	进样量（ng）	峰高（mV）	平均峰高（mV）	S/N
1	100	10.00	100.00	14.510	-
2	10000	0.100	1.00	0.158	-
3	20000	0.050	0.50	0.104	-	11.6
4	80000	0.0125	0.125	0.026	0.029	3.2
4-1	80000	0.0125	0.125	0.033
4-2	80000	0.0125	0.125	0.028

3.2.P.5.3.2.6进样精密度试验(色谱图见附件71～76)

精密称取本品（规格：10mg，批号：20100801）细粉0.6577g置50ml量瓶中，加0.05mol/L氢氧化钠溶液20ml，超声溶解，放冷至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，离心（3000rpm）10分钟，精密量取上清液1ml，置100ml量瓶中，用0.05mol/L氢氧化钠-甲醇（2:3）稀释至刻度，精密量取10μl注入液相色谱仪中，记录色谱图，结果见下表。

1%自身对照溶液精密度试验结果

项目	1	2	3	4	5	6	平均值	RSD
峰面积	210203	210451	210227	210652	210851	210749	210522	0.13%
保留时间	8.911	8.955	8.964	8.957	8.953	8.945	8.948	0.21%

进样精密度试验结果表明，1%自身对照溶液进样峰面积和保留时间精密度RSD均小于2.0%，能满足本品有关物质检查要求。

3.2.P.5.3.2.7溶液稳定性试验(色谱图见附件77～81)

精密称取本品（规格：10mg，批号：20100801）细粉0.6553g，置50ml量瓶中，加0.05mol/L氢氧化钠溶液20ml，超声使溶解，放冷至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，离心（3000rpm）10分钟，取上清液在室温放置8小时，分别在0、2、4、6、8小时，精密量取上述溶液各10µl，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果见下表。

溶液稳定性试验结果

时间（h）	0	2	4	6	8	平均值	RSD
主峰面积	22652515	22663551	22676001	22706635	22745063	22688753	0.16%
归一化含量（%）	98.148	98.074	97.995	97.910	97.830	97.991	0.13%
杂质个数	14	11	11	11	11	-	-

溶液稳定性试验结果表明，本品在流动相溶液中室温放置8小时稳定性较好，主峰面积的RSD值为0.16%，归一化含量RSD值为0.13%，均小于2.0%，本品的流动相溶液较稳定。

3.2.P.5.3.2.8有关物质测定方法的确定

通过专属性试验、检测限与定量限、1%自身对照精密度试验、溶液稳定性试验，拟订本品有关物质测定方法：

取含量测定项下的细粉适量(约相当于雷贝拉唑钠50mg)，精密称定，置50ml量瓶中，加0.05mol/L氢氧化钠溶液20ml，超声溶解，放冷至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，在3000rpm下离心10 分钟，取上清液作为供试品溶液；精密量取供试品溶液1ml，用0.05mol/L氢氧化钠溶液-甲醇(2:3)稀释至100ml，作为对照溶液。照含量测定项下的色谱条件，精密量取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20%～25%；再精密量取供试品溶液与对照溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分色谱峰保留时间的2倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1.5倍（1.5%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的3.5倍（3.5%）。

3.2.P.5.3.2.9耐用性(色谱图见附件82～96)

本品有关物质测定色谱条件参照含量测定项下。

耐用性研究项目	试验方法的条件	确认的耐用性范围
流动相成分比例	0.05mol/L磷酸盐溶液(用0.05mol/L磷酸二氢钾溶液调节0.05mol/L磷酸氢二钠溶液pH值至7.0)-甲醇 (40:60)	±2%
流速（活性成分的保留时间变化）	1.0ml/min	±0.05ml/min
色谱柱温度	30℃	±5℃
检测波长	290nm	285nm～290nm
流动相缓冲液pH值	7.0	±0.2
流动相缓冲液磷酸盐浓度	0.05mol/L	±0.002mol/L