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LCMS检测氨基酸、单胺,跪求检测方法。。。

  • pengliying851
    2013/06/30
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 想要将细胞培养基中的多种氨基酸分离出来,重点是要检测到GLU、ASP、GLY、GABA的含量,现有仪器安捷伦1260、tof 6530,具体的检测方法是什么有人做过么,还有,要检测去甲肾上腺素、多巴胺、5羟色胺、5羟吲哚乙酸的量,太难了,就等着这几个指标来毕业了,跪求检测方法了,大家帮帮忙吧
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  • sukiliang

    第1楼2013/06/30

    上安捷伦的网站查,那里肯定有文献的!

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  • sukiliang

    第2楼2013/06/30

    新出的那个消耗品手册里也有文献,明天上班我帮你查一下!

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  • sukiliang

    第3楼2013/07/01

    不知道合不合适你用

    GLU、ASP、GLY的方法

    使用Eclipse Plus C18 2.1X150mm,3.5μm 柱子分离氨基酸标样

    流动性:a:10mM Na2HPO4,10mM Na2B4O7,0.5mM NaN3,pH 8.2

    b:乙腈:甲醇:水(45:45:10)(v/v/v)

    流速:0.42ml/ml

    柱温:40℃

    检测器:UV338nm,然后15.7分钟切换到280nm

    样品:900pmol氨基酸,喊扩展的氨基酸和内标(500pmol)

    衍生化:自动化,在线,opa/fmoc

    梯度:

    时间 b

    0 2

    0.5 2

    20 57

    20.1 100

    23.5 100

    23.6 2

    25 stop

    希望这些对你有帮助!

    GABA这个没找到!

    pengliying851(pengliying851) 发表:想要将细胞培养基中的多种氨基酸分离出来,重点是要检测到GLU、ASP、GLY、GABA的含量,现有仪器安捷伦1260、tof 6530,具体的检测方法是什么有人做过么,还有,要检测去甲肾上腺素、多巴胺、5羟色胺、5羟吲哚乙酸的量,太难了,就等着这几个指标来毕业了,跪求检测方法了,大家帮帮忙吧

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  • 八杯水

    第4楼2013/07/01

    sukiliang 真热心!

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  • pengliying851

    第5楼2013/07/01

    sukiliang(sukiliang) 发表:不知道合不合适你用

    GLU、ASP、GLY的方法

    使用Eclipse Plus C18 2.1X150mm,3.5μm 柱子分离氨基酸标样

    流动性:a:10mM Na2HPO4,10mM Na2B4O7,0.5mM NaN3,pH 8.2

    b:乙腈:甲醇:水(45:45:10)(v/v/v)

    流速:0.42ml/ml

    柱温:40℃

    检测器:UV338nm,然后15.7分钟切换到280nm

    样品:900pmol氨基酸,喊扩展的氨基酸和内标(500pmol)

    衍生化:自动化,在线,opa/fmoc

    梯度:

    时间 b

    0 2

    0.5 2

    20 57

    20.1 100

    23.5 100

    23.6 2

    25 stop

    希望这些对你有帮助!

    GABA这个没找到!

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  • sukiliang

    第6楼2013/07/01

    这个是技术支持!

    剩下内几个多巴胺的我帮你再查查!

    pengliying851(pengliying851) 发表:谢谢,这个我先去试试,这个就是查的文献么,还是官网的技术支持?

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  • sukiliang

    第7楼2013/07/01

    儿茶酚胺类
    去甲肾上腺素,多巴胺

    色谱柱:PLRP-S 100A PL1111-3500 4.6X150mm,5μm
    流动相:95%25mM柠檬酸,25mM Na2HPO4,1mM庚烷磺酸:5 %ACN,pH2.85
    流速:1.0ml/min
    检测器:UV ,280nm

    这个没看到流动相的梯度!

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  • sukiliang

    第8楼2013/07/01

    还有一个文献是
    5羟色胺,HIAA-羟基吲哚乙酸
    色谱柱:ZORBAX Rx/SB-C8 4.6X75mm,3.5μm
    流动相:0.14mM磷酸钠,20mM EDTA,0.75mM 辛烷磺酸盐,9%甲醇 pH3.5
    流速:1.5ml/min
    柱温:26℃
    检测器0.75v vs Ag/AgCl,用电化学检测

    5羟吲哚乙酸,没看到这个!

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  • hujiangtao

    第9楼2013/09/09

    应助达人

    不挥发缓冲盐不能进质谱啊

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  • aggie_yan

    第10楼2013/09/09

    或者做GC-MS比较合适吧?

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