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qingqingcao 老师讲HPLC (之一) “技”、“道”之辩

qingqingcao

2013/07/02
药物分析

液相色谱（LC）

摘要：本文主要用比较生动形象的语言介绍了高效液相色谱原理，作用和应用领域。通过讲述“技”和“道”的辩证关系，让听者能够懂得，掌握仪器分析和万事万物之“道”，而不要纯粹钻研“技”的道理。

关键词：HPLC，教学，技，道

引言

高效液相色谱是仪器分析中应用最广泛，功能相当强大的分析仪器。我封高效液相色谱为仪器分析之“王”。它广泛运用于制药行业，食品检测行业，环境科学行业。著名的牛奶中三聚氰胺测试，就是使用我们的高效液相色谱来测试。但是在日常的工作和教学中，我发现，许多新手和分析化学专业毕业的大学生们对于高效液相色谱还是有着敬畏之心。因为，高校中对于仪器讲解的内容偏重于理论。而且由于课时数，许多内容没有讲清楚。而高效液相色谱应用如此广泛，我不得不对现有的一些仪器分析教材进行重新审视。由此产生重新书写的念头。本次青青草老师讲HPLC我想突破原有书本模式，通过比较生动的语言来让学生和各位朋友们掌握HPLC由哪些部件构成，HPLC如何使用，积分条件是什么意思，定量中内标法和外标法是什么意思，如何维护HPLC，方法学开发的思想等。我希望能够把我十多年从事HPLC的经验写下来，但是这个工作量实在太大，所以，我想把最普遍的和最需要说的内容写下，供各位同道和同学们学习批评。

1.“道”、“技”之辩.

说到“道”、“技”之辩，这分明是哲学的命题。哲学和自然科学他们是统一的。因为，每次上课，我都很希望给同学们讲学“道”和学“技”的问题。那么我问下同学们，你们是怎么理解这个问题的。你们学的各种分析测试方法，你们认为，你们学了派什么用处？

我来讲解我的看法吧。“技”也就是技术，现在很多人崇尚技术，技术高了，能够赚大钱，得到重用，但是，技术只是一种熟练工，它在单位时间内产生高的效率，高的质量，能够产生思想吗？也许吧。但是，我严肃地和我们同学讲，我们要学“道”。道通了，那么通过强化，技术也会好。那么这个“道”是什么呢？“道”就是道理，方法。说的玄乎一点就是思想。如果有了思想，那么我们遇到什么问题都能够克服，如果我们一味追求技术，不去深入思考，那么我们和操作工有什么区别。

但是我们在刚刚开始学习需要把握技巧。孰能生巧。巧是建立在技术高超的基础上。如果我们能够多多练习，多多学习，那么，HPLC 就是唯我所用，怎么用都不会担心其出问题。如果出问题，那么也可以自己解决。

我送给大家两个字。道，技。希望大家能够悟道，从而一通百通。

我总结一下，学习技术，只是一时一地的；掌握“道”则是永恒的。活学活用。需要我们：“技”上升为“道”。要求我们：

1）质量互变

2）善于总结

3）触类旁通

2 什么是色谱？

在讲什么是色谱之前，先提出三个问题：

1）色谱是干什么的？

2）色谱最基本原理是什么？

3)色谱有哪些？

如果我们看课本讲的，几乎所有的课本都讲俄国人发明了色谱。原始的色谱是柱色谱等等。我觉得，这是色谱历史的问题，无助于我们理解什么是色谱。所以，我想用我的话来讲。

2.1色谱干什么的和基本原理

色谱用我的话只要用三个词就能够说清楚，那就是：分离——定性——定量。

我们做一个类比。请看下图：

我们思考一下，这一堆各式硬币我们如何确定里面有多少钱，而且一角多少，五分多少？

我们是否首先先整理一下，那就是——分离。

在整理的同时，我们看到，里面有一分，两分，一角，一元等，那就是——定性

把整理好的分币叠加起来，我们一个个数，那叫做——定量。

色谱也是同样道理，先分离，再定性，然后定量。因为色谱分析的都是混合物质，混合物质首先通色谱柱，用流动相洗脱，根据物质被吸附和脱附能力不同，从而使得物质分离。通过标准物质在同样的色谱条件和环境下，确定色谱峰那个是那个。通过标准物质的峰面积来确定样品中对应的物质面积从而得出其含量。

所以，色谱的原理实际上很简单就是先分离——再定性——再定量三个步骤。而分离是色谱的核心。

2.2 色谱有哪些？

我们简单地分一下色谱

1）用气做流动相的就是气相色谱。gc gas chromatography

2）用溶液做流动相的是液相色谱。LC Liquid chromatography

其中高效液相色谱是我们本节课需要讲述的。它叫HPLC。欧美人讲HPLC 是high performance Liquid chromatography, 日本人说是;high pressure liquid chromatography.

3）离子色谱：IC

4）纸张色谱和薄层色谱。

3 气相色谱和高效液相色谱的比较

3.1气相色谱3.1.1气相气相对象是气体（高温变气体）

3.1.2适合于容易气化，且气化不会变性的有机化合物。例如，分析室内装潢中的甲醇，甲醛。

3.1.3适合于分子量小的有机化合物。

3.1.4用惰性气体作为载气（流动相）。

3.1.5进入检测器一般不容易回收。

3.2液相色谱

注：液相色谱有中速液相色谱，高效液相色谱还有超高压液相色谱等等。这里液相色谱是大致统称。

3.2.1液相液相，对象是液体

3.2.2不容易受热气化，或者受热变性物质。

3.2.3应用广泛，适合60-70%有机化合物。

3.2.4液体做流动相。泵作为动力系统。

3.3液相色谱和气相色谱的区别：

这张表格是青青草老师整理的哦。哈哈。希望同学们认真阅读。今天的课我们大致讲了三个问题

1.“技”“道”的关系

2.什么是色谱

3."gc","LC"的区别。

同学们若有兴趣可以看下相关参考书。今天的课就上到这里，请各位朋友拍砖。

qingqin[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gcao 老师讲HPLC（之一）， “技”、“道”之辩[/url]
qingqin[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gcao 老师讲HPLC（之二），高效液相色谱的构成[/url]
qingqin[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gcao老师讲HPLC（之三），高效液相色谱泵和进样器性能判断[/url]

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老多_小多

第1楼2013/07/02

qingqingcao老师，你的原创帖子最好不要分楼，因为怕评审的时候有专家漏看了
你的作品都有点教学的味道，呵呵

0

zhw19811005

第2楼2013/07/02

qingqingcao老师的大作还没发上来？

0

q1206

第4楼2013/07/02

支持一个！老师您太赞了！

0

精
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remioromen

第5楼2013/07/02

内容呢？自己管自己叫老师，汗

0

ylylttt

第6楼2013/07/02

很有深度，小板凳占座。

技道看到作者的题目，回想自己学习液相的过程也是一个技道技道不断循环上升的过程。期待楼主的大作

0

qingqingcao

第7楼2013/07/02

我真的是老师啊。而且教这门课的呀。
remioromen(remioromen) 发表:内容呢？自己管自己叫老师，汗

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qingqingcao

第8楼2013/07/02

十分感谢您的鼓励!
q1206(q1206) 发表:支持一个！老师您太赞了！

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给力

第9楼2013/07/02

qingqingcao老师的课浅显易懂，对第一次了解这方面的人肯定印象很深，这样他们就有非常大的兴趣，期待老师后面更精彩

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精
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qingqingcao

第10楼2013/07/02

感谢给力老师的鼓励。我也给力地多写原创。因为我实验做的少，所以，就写不了实验的文章了。

0

蓝人

第11楼2013/07/02

应助达人

是不是感觉没写完啊

感觉少了点什么啊

这是不是您的教案啊

分离-定性-定量的比如非常不错

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