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【求助】液相色谱两针峰面积重现性差

液相色谱(LC)

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  • 色谱柱是C18,25cm之前水/乙腈 70/30,柱压是10.2,前几天用磷酸二氢钾和磷酸氢二钠做缓冲溶液/乙腈 20/80,PH=8柱压6.7,之后用水/乙腈 70/30,柱压大概6.6,做一个样品重现性很好,几分钟之后做一个别的样品,稍微有点碱性,再做之前的样品,峰面积就不行了,差很多,不知道是什么原因造成的,我今天换了根柱子,也不平。

三人行 2013/08/02

用磷酸二氢钾和磷酸氢二钠做缓冲溶液/乙腈 20/80做流动相时,缓冲盐是否会有析出?

doczheng 2013/08/02

这两个样品都是要求在同一个条件下吗? 如果不是,可能残存在柱内难以洗脱, 同一根柱子柱压前后相差接近4,是不是有漏液的问题,仔细检查下,

zhoujin83 2013/08/02

[quote]原文由 [b]youlemei(youlemei)[/b] 发表: 色谱柱是C18,25cm之前水/乙腈 70/30,柱压是10.2,前几天用磷酸二氢钾和磷酸氢二钠做缓冲溶液/乙腈 20/80,PH=8柱压6.7,之后用水/乙腈 70/30,柱压大概6.6,做一个样品重现性很好,几分钟之后做一个别的样品,稍微有点碱性,再做之前的样品,峰面积就不行了,差很多,不知道是什么原因造成的,我今天换了根柱子,也不平。[/quote] 你的仪器是什么型号的啊,会不会是泵的隔膜破了,因为你用了缓冲盐。还有,你说用水:乙腈=1:9的溶液冲洗,是写反了吧

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  • 有水有渝

    第1楼2013/08/01

    应助达人

    水/乙腈 70/30前面是10.2,后面是6.6这个差得有点大,是不是没有平衡好,建议把系统和色谱柱清洗一下再检测,同时观察压力的变化

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  • 三人行

    第2楼2013/08/02

    用磷酸二氢钾和磷酸氢二钠做缓冲溶液/乙腈 20/80做流动相时,缓冲盐是否会有析出?

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  • youlemei

    第3楼2013/08/02

    用过之后用9/1 水/乙腈冲一个小时,又用乙腈冲洗,应该没事呀

    三人行(jncxyy2012) 发表:用磷酸二氢钾和磷酸氢二钠做缓冲溶液/乙腈 20/80做流动相时,缓冲盐是否会有析出?

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  • doczheng

    第4楼2013/08/02

    这两个样品都是要求在同一个条件下吗?
    如果不是,可能残存在柱内难以洗脱,
    同一根柱子柱压前后相差接近4,是不是有漏液的问题,仔细检查下,

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  • youlemei

    第5楼2013/08/02

    要是漏液能看出来吗,我也检查了,没有漏液,就是之前还好好的,突然就不行了。

    doczheng(doczheng) 发表:这两个样品都是要求在同一个条件下吗?
    如果不是,可能残存在柱内难以洗脱,
    同一根柱子柱压前后相差接近4,是不是有漏液的问题,仔细检查下,

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  • doczheng

    第6楼2013/08/02

    换了一根柱子也不行吗,试试用异丙醇冲洗一下系统的

    youlemei(youlemei) 发表:要是漏液能看出来吗,我也检查了,没有漏液,就是之前还好好的,突然就不行了。

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  • zhoujin83

    第7楼2013/08/02

    你的仪器是什么型号的啊,会不会是泵的隔膜破了,因为你用了缓冲盐。还有,你说用水:乙腈=1:9的溶液冲洗,是写反了吧

    youlemei(youlemei) 发表:色谱柱是C18,25cm之前水/乙腈 70/30,柱压是10.2,前几天用磷酸二氢钾和磷酸氢二钠做缓冲溶液/乙腈 20/80,PH=8柱压6.7,之后用水/乙腈 70/30,柱压大概6.6,做一个样品重现性很好,几分钟之后做一个别的样品,稍微有点碱性,再做之前的样品,峰面积就不行了,差很多,不知道是什么原因造成的,我今天换了根柱子,也不平。

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  • youlemei

    第8楼2013/08/03

    谢谢大家关心,找到原因了,是漏液了,但是不明显。

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  • 安平

    第9楼2013/08/04

    应助达人

    自动进样器泄漏么?

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  • 武灵

    第10楼2013/08/04

    是之前的漏液还是之后的漏液?

    youlemei(youlemei) 发表:谢谢大家关心,找到原因了,是漏液了,但是不明显。

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