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关于用哪个样品做空白调零的问题。

紫外可见分光光度计(UV)

  • 突然接触分光光度法,发现在细节问题上还有很多不足。

    第一个问题是:画标准曲线时用的空白对照调零的问题

    标准曲线时所用的空白,是不是取0mL 标液,其他试剂和处理都和其他的一样,然后用这个样品把仪器调零,然后再测剩下的样品,用所得值画标准曲线?

    第二个问题是:检测待测样品时用的空白的问题。

    如果待测样品没有颜色,是不是和作标准曲线时的空白一样,用那个空白调零就行了?然后直接从直线方程里计算出浓度?

    如果待测样品在加显色剂以前就存在颜色,这样的情况要怎么做?
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  • tutm

    第1楼2013/08/20

    不知道你测试是按某个标准方法做,还是研究工作中自行决定的测试方法。
    如果是前者,相关标准中应该就会有说明的
    如果是自己决定的,那一般可以看待测样品空白处理试液在测试波长下的吸光度,吸光度小的话,比如0.05以下,可以直接用蒸馏水调零;吸光度较高则应该用样品空白试液(就是你第一中说的)。
    如果待测样品没有其它颜色干扰,用标准曲线时的空白调零就行了

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  • dcfhvk

    第2楼2013/08/20

    个人觉得用蒸馏水调零不太可取,用0浓度的标准样品处理液调零做出的曲线才够精确。

    现在就在看GB,但看起来写的不够详细,也可能我是新手,看不懂GB里的含义。
    现在在看GB/T 17657-1999,里面的标准曲线是经过原点的,所以必定用0浓度的标准样品调零了,但里面也说了用蒸馏水调零,

    同时也有一个问题,先用蒸馏水调零,然后再用0浓度的标准样品液继续调零,这样的做法有什么意义呢?个人觉得没必要用蒸馏水调零了。难道是先消除水的影响,然后再去掉显色剂这些的影响?

    tutm(tutm) 发表:不知道你测试是按某个标准方法做,还是研究工作中自行决定的测试方法。
    如果是前者,相关标准中应该就会有说明的
    如果是自己决定的,那一般可以看待测样品空白处理试液在测试波长下的吸光度,吸光度小的话,比如0.05以下,可以直接用蒸馏水调零;吸光度较高则应该用样品空白试液(就是你第一中说的)。
    如果待测样品没有其它颜色干扰,用标准曲线时的空白调零就行了

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  • tutm

    第3楼2013/08/20

    用蒸馏水或纯溶剂调零的应用场合实际上是很多的,但这时也可能需要测试样品空白试液,并将其作为统计中的一个数据点。如果将这一溶液作为参比调零,那就等于人为设定该点为零值,这样在统计学的误差计算上可能意义就不同了。

    一般分光光度计每次调零后,上一次的调零状态就被更新了,只保留最后那次调零的状态,因此先用蒸馏水再用空白试液没必要

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  • 小虾米

    第4楼2013/08/20

    用蒸馏水调零和0浓度的标准样品处理液调零都是要做的,个人认为用蒸馏水调零比较好,考虑到OD值升高,准确度也会增加。

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  • dcfhvk

    第5楼2013/08/21

    我也觉得是这样的,除非是多波长测试,不然机器只能对一个样品调零。

    空白样品不调零,里面包括了显色剂的吸光度。用空白样品调零,排除了显色剂的吸光度。这两种哪种方法精度更好呢?

    tutm(tutm) 发表:用蒸馏水或纯溶剂调零的应用场合实际上是很多的,但这时也可能需要测试样品空白试液,并将其作为统计中的一个数据点。如果将这一溶液作为参比调零,那就等于人为设定该点为零值,这样在统计学的误差计算上可能意义就不同了。

    一般分光光度计每次调零后,上一次的调零状态就被更新了,只保留最后那次调零的状态,因此先用蒸馏水再用空白试液没必要

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  • zyl3367898

    第6楼2013/08/21

    应助达人

    根据方法要求,有的用纯水调零,有的用空白或0管调零。

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  • dcfhvk

    第7楼2013/08/21

    这个当然清楚,但是我看GB方法里用蒸馏水调了零,也测了0mL标准处理液。然而标准曲线却是经过原点的,也就是说把0mL标准处理液的吸光度减去了。
    我就搞不明白了,反正都要减去空白样品的吸光度,干嘛还要用水调零这个操作?

    zyl3367898(zyl3367898) 发表:根据方法要求,有的用纯水调零,有的用空白或0管调零。

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  • 烟雨江南

    第8楼2013/08/27

    应助达人

    用纯水调零再测标准0管,这应该是要看试剂空白A值高不高,试剂有没有干扰吧.

    dcfhvk(dcfhvk) 发表:这个当然清楚,但是我看GB方法里用蒸馏水调了零,也测了0mL标准处理液。然而标准曲线却是经过原点的,也就是说把0mL标准处理液的吸光度减去了。
    我就搞不明白了,反正都要减去空白样品的吸光度,干嘛还要用水调零这个操作?

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  • 夕阳

    第9楼2013/08/27

    应助达人

    理论上,标准溶液是可以不设空白溶液一项的,也就是说,标准工作曲线是可以不过零点的。
    但是习惯上,大家还是喜欢将标准空白液作为零点调节之用。
    但是实际上,样品空白的吸光值大都高于标准空白值;为了得到样品的真值,有的仪器设置有“减样品空白”这样一个功能。
    如果样品空白吸光值低于标准空白,那就有可能会产生负值或低于真值。则就另当别论了。

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  • lilylau

    第10楼2013/08/30

    一般我用纯水调零

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