花开见我
第4楼2013/08/24
“GB 8817-2001食品添加剂焦糖色(亚硫酸铵法、氨法、普通法)”,国标中使用的是薄层色谱法。
针对薄层色谱可能定性不准的情况,也有使用液相的。
DB13/T 1116-2009 焦糖色中的4-甲基咪唑的测定高效液相色谱法,地方标准使用的是高效液相色谱法。
下面将根据河北省地方标准DB13/T 1116-2009《焦糖色中的4-甲基咪唑的测定 高效液相色谱法》对检测方法做介绍。
6分析步骤
6.1 样品处理 准确称取3g样品(精确至0. 001 g),加15mL水溶解,移入250 mL分液漏斗中,加100 g/L碳酸钠溶液15 mL,加三氯甲烷一无水乙醇萃取液60 mL,剧烈振摇5 min。静置分层后,将有机相移入另一分液漏斗中,水相再按同样方法萃取一次,合并有机相;用100 g/L碳酸钠溶液洗涤提取液3次,每次30mL。然后将有机相通过无水硫酸钠滤入旋转蒸发瓶中,50℃浓缩至近干,取下,以水溶解残渣并定容至10mL,经0.45μm微孔膜过滤后供HPLC分析。
6. 2测定
6.2.1 HPLC参考条件
分析柱:C18, 4. 6 mm×250 mm粒度5 μm。
流动相:甲醇: 0. 05 mol/L磷酸二氢钾缓冲液((pH 3. 5,含0. 1%庚烷磺酸钠)=5: 95。
波长:210nm。
流速:1. 0 mL/min。
6.2.2标准曲线:分别进标准系列溶液各10 μL,进行HPLC分析,然后以峰面积为纵坐标,以4一甲基咪唑的含量为横坐标,绘制标准曲线。
6.2.3试样测定:吸取6. 1处理后的试样溶液10 μL进行HPLC分析,测定其峰面积,从标准曲线查得测定液中4一甲基咪唑的含量
7结果计算
试样中4一甲基咪唑的含量按下式计算:
式中:
X一试样中4一甲基咪唑的含量,单位为毫克每千克(mg/kg) ;
c一由标准曲线上查得进样液中4一甲基咪唑的量,单位为微克每毫升(μg/mL) ;
V一试样稀释液总体积,单位为毫升(mL) ;
m一试样质量,单位为克(g) ;
计算结果保留两位有效数字。
还有使用气相色谱法的。
■ 气相色谱法
柱 温:初温60 ℃,保持3min,以10 ℃/min升温至
180 ℃,保持5 min;进样口温度200 ℃;
检测器:NPD,温度260 ℃;
载 气 :高纯氮气,流速1 mL/min;
氢 气 :2 mL/min,空气:60 mL/min;
尾吹气:30 mL/min, 分流比为50:1;
顶空瓶加热温度100 ℃,平衡时间30 min;
进样量:1 mL
内标物:N, N-二甲基苯胺
symmacros
第5楼2013/08/24
国标中使用的是薄层色谱法,感觉有点落后了,薄层的灵敏度低,操作麻烦,其它方法要好些。
蓝爸
第7楼2013/09/11
刚查了一下 这个地标方法已经废止
但没有取代的方法