HPLC仪器性能检查
高效液相色谱广泛使用在制药,化工,环境监测上。对于我们使用的仪器,我们知道它的性能吗?我们如何知道我们的泵的准确性,我们如何知道仪器的稳定性?我们如何知道我们色谱柱的性能?今天qingqingcao开始讲解HPLC仪器性能检查,供各位朋友参考。
1.目的
1.1了解HPLC仪器基本操作
1.2熟悉HPLC色谱柱性能指标(有效塔板数,拖尾因子等)的测定方法,鉴别其优劣。
2.HPLC色谱仪性能指标
2.1泵流速准确性
2.2定量重复性(三次测试,计算RSD, RSD小于2.0%)
2.3死体积:(进样冲击)
2.4有效塔板数
2.5对称性(软件自带)
3.器材
3.1C18(5μ,150mm)
3.2100微升平头微量注射器
3.3.流动相过滤器,微孔滤膜
3.4.容量瓶等
3.5 HPLC
4.条件
4.1流动相:甲醇:水 87:17
4.2流速:1.0ml/min
4.3波长:254nm
5 数据和结果
5.1死体积: 进样冲击的峰 1.400min 在实际混合的那张图谱为1.383min。(见图五)
图一 :混合物的色谱图
图二 :萘的色谱图
图三:苯的色谱图
图四:甲苯的色谱图
5.2各个色谱峰保留时间
5.3流量精度
5.4稳定性和柱效
5.5 其他图谱
图五:相关数据图谱
6 结论
6.1 泵流速准确性测试证明:泵的流量符合要求。Fs=0.6%
6.2 各色谱峰连续进样RSD小于2%,证明测试稳定
6.3 萘的有效塔板数为6786.5 对称性为1.00 。可以在三个月后再次测试,观察有效塔板数是否变小。
6.4 对于紫外检测器,可以通过加入一定浓度的重铬酸钾溶液,测试其波长准确性。