反相色谱柱对分析样本的pH值有什么特别要求吗？

柱子是C18 安捷伦的

pH过低，而且进样次数太多的话可能会造成柱头塌陷，我们遇到过这种情况。

你可以看看柱子的说明，不同的柱子，就算是一样的C18，一样的厂家生产的，参数不一样也会导致使用的PH值范围不一样。


如果你分析样品时发现每个色谱峰都双峰出现（出峰越快，双峰的可能性会减少），尤其采用单一纯物质时，可以肯定色谱柱出问题－柱头受损或柱头固定相变脏或流失。如果进样量少，原来色谱柱正常，色谱峰的形状多为一大峰带一小峰，不一定拖尾，这一般应是柱头受堵，将色谱柱反过来接，用流动相冲洗或酸洗或其它溶剂，将堵在柱头的残留物冲掉，再反过来，一般情况下就行了。

pH2不算太低，一般的柱子都能承受吧，而且样品的pH会被流动相稀释，流动相的pH更重要些。
我觉得楼主的问题更可能是样品或流动相没有过滤造成的。这样的话可以配制一些10%异丙醇溶液，用0.2或0.1的流速倒冲色谱柱一晚，第二天再测试一下柱效看看。

这个办法真的可以试试，指不定就是什么小微粒吧柱头堵了……现在的色谱柱通常都能够耐受pH2，但是基本也是极限pH了不能再低了……