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如何测试柱效

flyingsward

2013/11/06

凝胶色谱（GPC）

请问各位，在用一根新的柱子前，通常要进行柱效的测试，请问在THF流动相和DMF流动相中，分别用什么方法来测试柱效呢？我用的是PL-mixed C和 PL-mixed D 柱。在四氢呋喃相中，可以用仪器软件比较方便的得到柱效（可以由系统峰中对称性好的峰得到），或者按照说明书上用BHT得到。可是在DMF流动相中，系统峰很杂乱，没有很好峰型且分得开的峰，无法由软件计算得出，请问可以用什么方法得到柱效呢？

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小不董

第1楼2013/11/07

应助达人

直接进一针样品空白或者试剂也没一个好的溶剂峰或者空白峰吗？

或者就进一针纯的DMF，你流动相有LiBr的，应该有峰出现的，就用这个应该有峰出现，就可以测定其柱效了。
flyingsward(flyingsward) 发表:请问各位，在用一根新的柱子前，通常要进行柱效的测试，请问在THF流动相和DMF流动相中，分别用什么方法来测试柱效呢？我用的是PL-mixed C和 PL-mixed D 柱。在四氢呋喃相中，可以用仪器软件比较方便的得到柱效（可以由系统峰中对称性好的峰得到），或者按照说明书上用BHT得到。可是在DMF流动相中，系统峰很杂乱，没有很好峰型且分得开的峰，无法由软件计算得出，请问可以用什么方法得到柱效呢？

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flyingsward

第2楼2013/11/11

我进一针空白或者DMF 都没有好的峰出现，无法测试柱效。
小不董(doxw0323) 发表:直接进一针样品空白或者试剂也没一个好的溶剂峰或者空白峰吗？

或者就进一针纯的DMF，你流动相有LiBr的，应该有峰出现的，就用这个应该有峰出现，就可以测定其柱效了。

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小不董

第3楼2013/11/11

应助达人

按理不会，那你进一针DMF的水溶液看看，手动进样吗？进一针含有空气的也可以
flyingsward(flyingsward) 发表:我进一针空白或者DMF 都没有好的峰出现，无法测试柱效。

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flyingsward

第4楼2013/11/11

进了一针空气也不行，DMF水溶液就是在水中滴一滴DMF吗？
小不董(doxw0323) 发表:按理不会，那你进一针DMF的水溶液看看，手动进样吗？进一针含有空气的也可以

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polylactic

第5楼2013/11/11

连用进单一流动相都无法获得分离的峰，是不是柱子有问题？

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小不董

第6楼2013/11/11

应助达人

我也怀疑是你的柱子不行了，好换了。

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flyingsward

第7楼2013/11/12

我上传在两张图，分别进了一针air和DMF，麻烦看一下，可以用air谱图中的后面两组峰测试柱效吗？另外在做纯DMF时候，强度太大，超出检出限,该如何解决？
小不董(doxw0323) 发表:我也怀疑是你的柱子不行了，好换了。

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分
该帖子已被版主-老多_小多加4积分，加2经验;加分理由:及时跟进帖子讨论

flyingsward

第8楼2013/11/12

上传了两张谱图，分别做了针air和纯DMF，是不是说明柱子该换了
polylactic(polylactic) 发表:连用进单一流动相都无法获得分离的峰，是不是柱子有问题？

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小不董

第9楼2013/11/12

应助达人

看图谱还好呀，你在采集数据的时候，RI的信号极性选择为负的，这样采集到的峰就是正的了，或者在积分是选择积倒峰就可以了
flyingsward(flyingsward) 发表:上传了两张谱图，分别做了针air和纯DMF，是不是说明柱子该换了

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histone1

第10楼2013/11/13

DMF相的话，进一针THF好了。

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