1.保留时间漂移 A 温度变化 设定一个恒定的温度,而且当室温较所需温度低时要注意提高柱温的设定值。 B 流动相的问题 使用预混合则要注意每次配液的准确性、精密度与pH值的变化;流动相被污染或加入添加剂后可能对待测组分存在干扰。流动相的pH值和样品的pK值太接近,即便是使用有缓冲盐的流动相也会引起保留时间的波动,流动相的pH值比待分离组分的pK值至少相差2个pH单位 2.异常的色谱峰 A 出现一个或几个负峰 流动相吸收本底高;进样过程中进入空气;由于样品中的某个组分的紫外吸收低于流动相的紫外吸收。 B 均为负峰 信号电缆接反或检测器输出极性设置颠倒;光学装置尚未达到平衡。 C 均为宽峰 系统未达到平衡;溶解样品的溶剂极性在于流动相极性;色谱柱尺寸及类型选择不正确;色谱柱或保护柱被污染或柱效降低;由于温度变化所产生样品粘度过大;进样器故障或进样体积误差;检测器设置不正确,定量环体积不正确;检测池污染;检测器灯出现故障。 D 出现双峰或肩峰 进样量或样品浓度过高;溶解样品的溶剂极性较流动相极性强;保护柱或色谱柱污染或失效或堵塞;过滤器堵塞;分析柱“柱头塌陷”。 E 拖尾峰 检测器设置不正确;进样体积太大或样品浓度太高。较早流出的峰拖尾,柱外效应引起的(检查液相色谱系统的毛细连接、毛细管及检测池);较晚流出的峰拖尾,待分离化合物和固定相表面非特异性相互作用(在流动相中加入三乙胺或醋酸盐或者选择合适的固定相可以改善) F 出现平头峰出现鬼峰 可能为上次样品的残余。在每次进完样后需要用充足的时间来平衡和清洗整个系统;样品中存在未知物,改进样品的预处理;流动相污染,更换新流动相,尽可能做到流动相现配现,隔夜的流动相应放入冰箱储存再次使用时要进行过滤,尽可能使用HPLC级试剂。