XXXX中药注射剂重金属及有害元素残留量检测
前言：
XXXX是我公司的拳头产品，根据《中国药典》2010年版第二增补本要求，所有中药注射剂新增重金属及有害元素残留量的检测，与大家共同分享一下，初步的检测方法和检测结果。
检测过程与结果：
1.铅的测定（石墨炉法）
1.1 操作前准备
1.1.1 仪器与用具 原子吸收分光光度计、石墨管、铅元素的空心阴极灯、冷却循环水、高纯氩气、微波消解仪、电热板、2个1000ml容量瓶、6个100ml容量瓶、2个25ml容量瓶、5个50ml容量瓶、3个0.5ml单标线吸量管、1个2ml单标线吸量管、2个5ml单标线吸量管、1个5ml分度吸量管、1个10ml分度吸量管、高纯氩气。
1.1.2 试剂与试药 铅单元素标准溶液、硝酸、2%稀硝酸、10%稀硝酸、1%磷酸二氢铵、0.2%硝酸镁、纯化水
1.2测定条件：
仪器参数：灯电流：3mA 原子化器位置：-2mm 扣背景方式：氘灯
能量调节：背景能量与灯能量接近100%
石墨炉加热条件：波长283.3nm，干燥温度120℃，持续15秒，灰化温度600℃，持续20秒；原子化温度1700℃，持续4秒,净化温度：1800℃持续3秒
分别精密量取空白溶液、镉标准溶液、镉供试品溶液各10µl，精密加含1%磷酸二氢胺和0.2%
硝酸镁的溶液5µl，混匀，注入石墨炉原子化器，测定吸光度。
1.3标准曲线的制备
铅标准储备液 ρ=1000µg/ml
精密量取铅标准储备液（ρ=1000µg/ml）1ml，用2%HNO3溶液定容至1000 ml（ρ=1µg/ml），精密量取10ml，用2%HNO3溶液定容至100 ml（ρ=100ng/ml），将此标准溶液稀释为每1ml 分别含铅0.0、10.0、20.0、40.0、60.0、80.0、100.0ng的溶液。
1.4供试品储备溶液的制备
精密量取供试品溶液3ml；置聚四氟乙烯的消解罐内，加硝酸5ml，混匀，浸泡过夜，盖好内盖，旋紧外套，置微波消解炉内，进行消解。
消解程序：
升温时间(分钟) | 温度（℃） | 保持时间(分钟) |
4 | 110 | 3 |
3 | 150 | 3 |
3 | 185 | 8 |
消解完全后，放冷至室温。将消解罐置插孔式电热板上160℃下缓缓加热至红棕色蒸气挥尽，并继续浓缩至约3ml，放冷，用水转移供试品溶液至25ml，容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，即得。作为供试品贮备液，转移至聚乙烯瓶内放入冰箱中冷藏保存，用之前取出放至室温使用。
1.5 标准溶液测试结果：
序号 | 标准溶液浓度（ng/ml） | 吸收值（Abs） |
1 | 0 | 0.0039 |
2 | 10 | 0.0091 |
3 | 20 | 0.0210 |
4 | 40 | 0.0436 |
5 | 60 | 0.0645 |
6 | 80 | 0.0825 |
7 | 100 | 0.1115 |
1.6 标准曲线方程如下 ：
C=926.7552*A-0.2118 相关系数：r=0.99765
C=标准溶液中铅的含量
A=标准溶液中铅的吸光度值（Abs）
1.9 六个批次XXXX铅含量：
批号 | 20131201 | 20131202 | 20131203 | 20131204 | 20131205 | 20131206 |
供试品含量 （μg/ml） | 0.02 | 0.06 | 0.02 | 未检出 | 未检出 | 未检出 |
2.镉的测定（石墨炉法）
2.1 操作前准备
2.1.1 仪器与用具 原子吸收分光光度计、石墨管、镉元素的空心阴极灯、冷却循环水、高纯氩气、微波消解仪、电热板、2个1000ml容量瓶、6个100ml容量瓶、2个25ml容量瓶、11个50ml容量瓶 、2个0.5ml单标线吸量管、1个1ml分度吸量管、1个2ml单标线吸量管、7个5ml单标线吸量管、1个5ml分度吸量管、1个10ml分度吸量管
2.1.2 试剂与试药 镉单元素标准溶液、硝酸、2%稀硝酸、10%稀硝酸、1%磷酸二氢钠、0.2%硝酸镁、纯化水
2.2标准曲线的制备
镉标准储备液 ρ=1000µg/ml
精密量取镉标准储备液（ρ=1000µg/ml）1ml，用2%HNO3溶液定容至1000 ml（ρ=1µg/ml），精密量取1ml，用2%HNO3溶液定容至100 ml（ρ=10ng/ml），将此标准溶液稀释为每1ml 分别含铅0.00、0.40、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ng的溶液。
2.3镉供试品溶液的制备：直接取供试品储备溶液，即得。
2.4测定条件：参考条件：波长228.8nm，干燥温度100℃，持续20秒，灰化温度500℃，持续20秒；原子化温度1900℃，持续3秒，净化温度：,2000℃持续3秒。
分别精密量取空白溶液、镉标准溶液、镉供试品溶液各10µl，精密加含1%磷酸二氢胺和0.2%
硝酸镁的溶液5µl，混匀，注入石墨炉原子化器，测定吸光度。
2.5标准溶液测试结果：
序号 | 标准溶液浓度（ng/ml） | 吸收值（Abs） |
1 | 0 | 0.0002 |
2 | 0.4 | 0.0208 |
3 | 1.0 | 0.0364 |
4 | 2.0 | 0.0599 |
5 | 4.0 | 0.1002 |
6 | 6.0 | 0.1500 |
7 | 8.0 | 0.1912 |
8 | 10.0 | 0.2411 |
2.6标准曲线方程如下 ：
C=43.0831*A-0.3822 相关系数：r=0.99868
C=标准溶液中镉的含量
A=标准溶液中镉的吸光度值（Abs）
2.7 六个批次XXXX镉含量：
批号 | 20131201 | 20131202 | 20131203 | 20131204 | 20131205 | 20131206 |
供试品含量 （μg/ml） | 0.04 | 0.03 | 未检出 | 未检出 | 未检出 | 未检出 |
3 砷的测定（氢化物法）
3.1 操作前准备
3.1.1 仪器与用具 原子吸收分光光度计、氢化物发生器、砷元素的空心阴极灯、空气压缩机、冷却循环水、高纯氩气、微波消解仪、电热板、个1000ml容量瓶、6个100ml容量瓶、6个25ml容量瓶、1个0.5ml单标线吸量管、1个1ml单标线吸量管、1个2ml单标线吸量管、1个5ml分度吸量管、1个10ml分度吸量管、6个10ml单标线吸量管、2个25ml容量瓶、2个50ml容量瓶、高纯氩气
3.1.2 试剂与试药 含1.5%硼氢化钠的0.3%氢氧化钠溶液、盐酸溶液（1→100）、2%硝酸溶液、砷单元素标准溶液、10%抗坏血酸溶液、25%碘化钾溶液、盐酸溶液（20→100）、纯化水。
3.2标准曲线的制备
砷标准储备液 ρ=1000µg/ml
精密量取砷标准储备液（ρ=1000µg/ml）1ml，用2%HNO3溶液定容至1000 ml（ρ=1µg/ml），精密量取10ml，用2%HNO3溶液定容至100ml（ρ=100ng/ml），精密量取0ml、1ml、2ml、
4ml、6ml、8ml、10ml，分别加入25%碘化钾溶液1ml，10%抗坏血酸溶液1ml，盐酸溶液（1：1）1ml，用2%HNO3溶液定容至100 ml，制成每1ml 分别含砷0.0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ng的溶液。
3.3砷供试品溶液的制备
取供试品储备溶液，精密量取1ml，加入25%碘化钾溶液1ml，混匀，加入10%抗坏血酸溶液1ml，加入盐酸溶液（1：1）1ml，置10ml纳氏比色管中，加水稀释至刻度，摇匀，放置一小时，即得。
3.4 测定条件：采用适宜的氢化物发生装置，以含1.5%硼氢化钠和0.3%氢氧化钠的溶液（临用前配制）作为还原剂，盐酸溶液（1→100）为载液，氩气为载气，检测波长为193.7nm。
3.5标准溶液测试结果：
序号 | 标准溶液浓度（ng/ml） | 吸收值（Abs） |
1 | 0 | -0.0004 |
3 | 1.0 | 0.0060 |
4 | 2.0 | 0.0126 |
5 | 4.0 | 0.0284 |
6 | 6.0 | 0.0413 |
7 | 8.0 | 0.0610 |
8 | 10.0 | 0.0786 |
3.6标准曲线方程如下 ：
C=126.4490*A+0.3190 相关系数：r=0.99778
C=标准溶液中砷的含量
A=标准溶液中砷的吸光度值（Abs）
3.7 六个批次XXXX砷含量：
批号 | 20131201 | 20131202 | 20131203 | 20131204 | 20131205 | 20131206 |
供试品含量 （μg/ml） | 未检出 | 未检出 | 未检出 | 未检出 | 未检出 | 未检出 |
4汞的测定（冷蒸气吸收法）
4.1 操作前准备
4.1.1 仪器与用具 原子吸收分光光度计、氢化物发生器、汞元素的空心阴极灯、空气压缩机、冷却循环水、高纯氩气、微波消解仪、电热板、纯氩气、2个1000ml容量瓶、2个10ml容量瓶、6个50ml容量瓶、2个25ml容量瓶、1个0.5ml单标线吸量管、1个1ml分度吸量管、1个2ml单标线吸量管、1个5ml单标线吸量管、1个10ml单标线吸量管
4.1.2 试剂与试药 1.0%硼氢化钠、0.2%氢氧化钠、盐酸溶液（1→100）、汞单元素标准溶液。
4.2标准曲线的制备
汞标准储备液 ρ=1000µg/ml
精密量取汞标准储备液（ρ=1000µg/ ml）1ml，用2%HNO3溶液定容至1000 ml（ρ=1µg/ml），精密量取10ml，用2% HNO3溶液定容至100 ml（ρ=100ng/ml），精密量取0ml、1ml、2ml、
4ml、6ml、8ml、10ml，分别加入盐酸溶液（1：1）10ml, 用2% HNO3溶液定容至100 ml，
制成每1ml 分别含汞0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ng的溶液。
4.3汞供试品溶液的制备
取供试品储备溶液，精密量取1ml，加入盐酸溶液（1：1）1ml，置10ml纳氏比色管中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。
4.4 测定条件：采用适宜的氢化物发生装置，以含1.0%硼氢化钠和0.2%氢氧化钠的溶液（临用前配制）作为还原剂，盐酸溶液（1→100）为载液，氩气为载气，检测波长为253.6nm。
4.5标准溶液测试结果：
序号 | 标准溶液浓度（ng/ml） | 吸收值（Abs） |
1 | 0 | 0.0003 |
3 | 1.0 | 0.0023 |
4 | 2.0 | 0.0099 |
5 | 4.0 | 0.0324 |
6 | 6.0 | 0.0501 |
7 | 8.0 | 0.0720 |
8 | 10.0 | 0.0888 |
4.6标准曲线方程如下 ：
C=106.0905*A+0.5517 相关系数：r=0.99644
C=标准溶液中汞的含量
A=标准溶液中汞的吸光度值（Abs）
4.7 六个批次XXXX汞含量：
批号 | 20131201 | 20131202 | 20131203 | 20131204 | 20131205 | 20131206 |
供试品含量 （μg/ml） | 未检出 | 未检出 | 未检出 | 未检出 | 未检出 | 未检出 |
5.铜的测定（火焰法）
5.1 操作前准备
5.1.1仪器与用具 原子吸收分光光度计、火焰原子化器、高纯氩气、高纯乙炔气、铜元素的空心阴极灯、空气压缩机、冷却循环水、高纯氩气、微波消解仪、电热板、纯氩气、7个100ml容量瓶、1个0.5ml单标线吸量管、2个1ml单标线吸量管、1个2ml单标线吸量管、1个5ml单标线吸量管、1个10ml单标线吸量管
5.1.2 试剂与试药 铜元素标准溶液、2%硝酸溶液确认取用的吸量管经标定合格，且洁净干燥。 确认试药与试液在有效期内，观察性状，不得有异物、发霉等现象，如有异常或超出有效期，重新配制。
5.2标准曲线的制备
铜标准储备液 ρ=1000µg/ ml
精密量取铜标准储备液（ρ=1000µg/ml）10ml，用2% HNO3溶液定容至1000ml（ρ=10µg/ml），分别精密量取0.0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml，，用2%HNO3溶液定容至100 ml，制成每1ml 分别含铜0.00、0.1、0.2、0.40、0.6、0.80、1.00ug的溶液。
5.3铜供试品溶液的制备：直接取供试品储备溶液，即得。
5.4依次将空白溶液、铜标准溶液、铜供试品溶液喷入火焰，测定吸光度。
5.5标准溶液测试结果：
序号 | 标准溶液浓度（μg/ml） | 吸收值（Abs） |
1 | 0 | -0.0007 |
3 | 0.1 | 0.0123 |
4 | 0.2 | 0.0251 |
5 | 0.4 | 0.0462 |
6 | 0.6 | 0.0673 |
7 | 0.8 | 0.0889 |
8 | 1.0 | 0.1138 |
5.6标准曲线方程如下 ：
C=8.9214*A-0.0069 相关系数：r=0.99952
C=标准溶液中铜的含量
A=标准溶液中铜的吸光度值（Abs）
5.7 六个批次XXXX铜含量：
批号 | 20131201 | 20131202 | 20131203 | 20131204 | 20131205 | 20131206 |
供试品含量 （μg/ml） | 未检出 | 未检出 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
总结与讨论：重金属检测属于痕量分析，对检测环境、仪器和检测人员有很高的要求。我们在有限的的条件下，要十分注重检测的每个细小的环节，因为一点的误差都会影响检测的结果。通过对以上六各批次样品的检测，发现样品的空白值较大，直接影响监测数据的准确性。 采用合适的扣背景方式，使用更高级别的试剂是降低干扰的有效方法。本次检测为新标准执行前的预检测，随后我们还要做方法学的验证，这样我们的检测方法才可以正常使用。
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