1、 脂肪酸的提取
取2g肉样,于研钵中剪碎,分三次(20ml、20ml、10ml)倒入溶剂(CHCl3:CH3OH/2:1)50ml,快速研磨成浆并冲洗研钵;将匀浆用滤纸过滤至100ml棕色容量瓶后加入20%浓度的NaCl溶液10ml;将容量瓶盖上玻璃盖,充分振荡,并用Folch2(CHCl3:CH3OH:H2O/3:47:48)溶液冲洗瓶壁。静置至溶液形成明显的上下两层,将上层液吸出弃去。
2、脂肪酸的皂化和酯化
于上述容量瓶中加入0.5M NaOH-CH3OH溶液5ml,充分振荡后于60℃水浴皂化7min,然后持续通入氮气,吹干溶剂加入14%BF3-CH3OH溶液5ml,于通风橱中80℃水浴5min;冷却后加入8ml正己烷振荡,加入饱和NaCl溶液至瓶颈处,静置至分层,吸出上层有机相,置10ml离心管中3000r/min离心20min。取上清液进行GC-MS分析。
注:为啥要加20%浓度的NaCl溶液10ml?