其实影响延迟体积最主要是混合器的混合体积,管路的影响倒是其次(0.3内径的10cm也就7ul左右),岛津LC-20A以前标配的混合器是2.6ml,可以改1.7ml和0.5ml,这是老混合器。现在又出了20ul 40ul 100ul 180ul的高效混合器。
zhoujin83(zhoujin83) 发表:延迟体积的概念是梯度混合点到柱头之间的管道体积,比如agilent四元泵,其延迟体积为比例阀到色谱柱柱头间的体积。因为存在延迟体积的存在,在运行梯度方法时,一开始会运行一段等度。因此,其可能会对分离度及保留造成影响,并进一步可能会对方法转移或验证造成影响。延迟体积越大,可能造成的影响也越大。但是延迟体积是一定存在的,agilent的一般可能达到500uL-1ml,岛津的可能要大些延迟体积的大小应该是HPLC的一个很重要的性能指标。
最近我在开发一个HPLC的方法时,因为保留很弱,所以我尝试保持5%乙腈运行5min,期望能增加保留,结果是失望了,因为仪器延迟体积大,其保留只增加了0.5min,与我之前用agilent的一般能增加2min以上的情况大不一样。不知道还有坛友有类似的经历吗,大家一起交流交流。