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求助,液相色谱一个峰走成两个峰了

  • lelesunshine
    2014/03/07
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 悬赏金额:10积分状态:已解决
  • 液相色谱检测人血白蛋白中多聚体含量时,乙酰色氨酸的峰走成了两个峰,试验用的是凝胶柱,用的PH7.0的磷酸盐缓冲液,请老师们指教下,这是怎么回事,柱子是新的,才用几天,之前都是正常的,昨天用纯水冲洗柱子两个小时!今天进同样的样品,走出来的峰是一样的

    下图,一个是正常的,一个是走成两个峰的,请老师们指教

zcc10000 2014/03/07

您可以查一下:1、进样时进样针是否混进气泡 2、样品是否有污染(可以换个标准品进样看看) 3、色谱柱质量是否存在问题 从色谱图来看,分叉的峰前面的基线也相比你之前的差,样品被污染的可能性较大。

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  • 支点

    第1楼2014/03/07

    应助达人

    没用过你的条件做氨基酸,但看你的图。如果是色谱分离问题的话前面的峰也会分叉,只有一个分叉的话应该还是组分的问题。希望有人能帮着解答一下。

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  • zcc10000

    第2楼2014/03/07

    您可以查一下:1、进样时进样针是否混进气泡
    2、样品是否有污染(可以换个标准品进样看看)
    3、色谱柱质量是否存在问题
    从色谱图来看,分叉的峰前面的基线也相比你之前的差,样品被污染的可能性较大。

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  • zhaohua8011

    第3楼2014/03/07

    色谱柱不会这么脆弱,样品问题大,再处理一份看看!

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  • 小帅at仪器

    第4楼2014/03/08

    同样条件下,再进一针,如果还是两个峰,那就是样品的问题了

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  • 三人行

    第5楼2014/03/08

    新配制样品液进样看看情况。

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  • Eason

    第6楼2014/03/10

    2楼说的很对,估计是样品出了原因

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  • doczheng

    第7楼2014/03/10

    样品脏了可以重配,柱子脏了还得冲洗,麻烦

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  • lelesunshine

    第8楼2014/03/10

    太感谢大家了,确认了,是样品问题~

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  • 爱杰杰

    第9楼2014/03/19

    这种问题无非就是柱子问题、样品问题、样品残留
    1、柱子如果有问题的话,基线可能不会这么平,第一针的保留时间也可能不会跟之前的那么接近,而且第一个峰还是挺不错的,应该可以排除色谱柱的原因。
    2、样品残留,也就是说那个分叉峰可能是上一针的残留,但是这种情况下,一般峰宽都很宽,所以基本可以排除进样残留的原因。
    所以,是你自己样品的原因。

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