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LTQ ORBITRAP 液质联用仪定量分析氨基酸代谢物线性差

david6218

2014/04/24

液质联用（LCMS）

我实验室质谱是LTQ orbitrap, 主要用来做蛋白组学，最近有客户要做氨基酸代谢物定量分析，我建立分析方法，采用一级MS全扫，提取离子定量，做标准曲线（不含基质）发现6个物质只有一个线性在99%以上，其余在96-99之间，标曲6个点最高2ug/ml，最低2ng/ml, 在高浓度区域的点（2ug,1ug）总是在线性下面，响应偏差，形成往上抛物线状，高中低浓度的精密度均很好。是不是浓度过高造成离子抑制，做了些改进，在样品和流动相中均提高甲酸浓度，并在离子源部分提高气流，电压等，线性并未改善。我的样品采用5%DMSO溶解（含甲酸，不好溶解，所以用DMSO）, 流动相采取乙腈-水（含甲酸）。我看到很多文章在用此方法标曲线性均在99以上，可是我总是达不到。是不是离子阱不适合分析这类样品，或者确实是非线性，要用加权最小二乘进行处理。各位有什么建议，做哪些改进能提高线性呢？先行谢过。

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fensire

第1楼2014/04/24

换流动相试试？比如用甲醇和水（含甲酸），或者干脆缩小线性范围吧

0

david6218

第2楼2014/04/25

流动相可以换换试一下，还有把2ug点去掉试试，

0

八杯水

第3楼2014/04/25

你设的浓度点范围是不是有点宽了？

0

ie4680180

第4楼2014/04/25

应助达人

浓度点范围有点宽了，把2ug点去掉也好。

0

david6218

第5楼2014/04/25

我把流动相换成甲醇和水（含甲酸），去掉2ug的点，有的检测信号增加有的下降，线性还是基本在95-99之间，抛物线状，不解高浓度信号为何总是下降

0

hujiangtao

第6楼2014/04/26

应助达人

线性范围有点宽了

0

liufeilzu

第7楼2014/04/27

你是ft的扫描？还是ltq的扫描？建议修改一下分析时间

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david6218

第8楼2014/05/26

FT扫描，LTQ精度不够，范围太宽了，改为5-500，线性良好

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yellow47

第9楼2014/06/05

orbi能进的离子数目很有限，用FT来定量的话很容易就饱和了

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皮皮娟

第10楼2014/06/05

LTQ orbi 这玩意跟tof 一样线性窄了点，要做定量不要范围太宽了。

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