【求助】药物有机溶剂残留

顶空毛细管柱气相色谱法分析测定药品中残留溶媒
邓 青 邓 岚
(云南省分析测试研究所 昆明 650051) (云南大学微生物研究所 昆明 650091)

摘要 目的：建立一种快速测定药品中残留溶媒的分析方法。方法：采用自动顶空取样，气相色谱毛细管柱分离，内标与外标相结合的方法分析测定药品中常见的五种残留溶媒（甲醇、丙酮、二氯甲烷、苯、甲苯）。结果：分析测定回收率为99.37～101.04%。变异系数为1.75～2.36%。结论：顶空毛细管柱气相色谱法快速、简便、准确是测定药品中残留溶媒较为理想的方法。

关键词：顶空进样，毛细管柱气相色谱，定量测定，药品，残留溶媒

药品中残留溶媒是指在合成原料药，辅料或制剂生产的过程中使用或产生的挥发性有机化学物质。它们在实际的生产中未能被完全地清除。近年来，药品中残留有机溶剂的毒性和致癌作用日益引起各方面的重视。药品中残留有机溶剂于1997年被美国FDA列为药品监控项目。我国药品中残留有机溶剂检测也越来越受到有关方面的重视［1］。为适应我国医药工业随着WTO进入国际市场的需要，提高药品的使用安全性，开展和完善药品中残留有机溶剂检测工作势在必行。本文初步研究探索采用顶空毛细管柱气相色谱法分析药品中残留挥发性有机溶剂。顶空气相色谱法只将挥发和半挥发的组份引入柱子，可避免非挥发性的物质对系统的污染，样品前处理简便，分析效率高。结果表明，本方法快速、准确、重现性好。

1    实 验 部 分
1.1 分析设备及条件
美国PE-8700气相色谱仪；FID检测器；美国PE 公司HS-6B顶空进样器；澳大利亚SGE公司SE-54弹性石英毛细管柱，内径0.32mm，长30米，膜厚1.0μm；本文实验使用的顶空进样器采用压力平衡进样原理，进样量采用时间开关连续调节，研究摸索的分析参数条件如表一：

1.2 化学试剂及溶液配制
样品分析溶剂DMF(N•N一二甲基甲酰胺)， 分析残留溶媒组分（甲醇、丙酮、二氯甲烷、苯、甲苯）及内标正丙醇均为分析纯试剂。
内标溶液：准确移取50.0μl正丙醇于100ml容量瓶中，用DMF定容。
标准储备溶液：准确移取甲醇、丙酮、二氯甲烷各50.0μl，苯、甲苯各30.0μl于100ml容量瓶中用DMF定容。
标准溶液：取标准储备溶液0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml内标溶液各5.0μl于25.0ml容量瓶中用DMF定容。分别取2.0ml于顶空瓶内密封，备gc分析用。
样品溶液： 准确称取样品1.500g于25.0ml容量瓶中，加入5.0ml内标溶液, 用
DMF定容。取2.0ml于顶空瓶内密封，备gc分析。
表1:气相色谱和顶空进样器条件
Table 1: gas chromatographic and headspace autosampler conditions
气相色谱参数 gc parameter    顶空进样器参数 Headspace parameter
载气 Gass ： N 2（＞99.99%）    顶空瓶取样量 Sample volume ：2.0ml
柱前压 Head pressure ：75KPa    顶空瓶容积 Vial size ：5ml
进样器温度 Injector temp. ：140℃    样品平衡温度 Sample-equil. temp. ：80℃
检测器温度 Detector temp. ：280℃     样品平衡时间 Sample-equil. time ：45min
氢气 H 2： 40ml/min     顶空压力 Headspace press ：75KPa
空气 Air： 400ml/min    压力平衡时间 Press-equil. time：0.5min
柱升温程序 Oven program.：
50℃～170℃(5℃/min)    进样时间 Injector time ：0.10min

1.3 系统适应性测试
顶空气相色谱法分析要研究摸索两部分：顶空和气相色谱的分析条件参数，除常规毛细管柱气相色谱分析所需要的各种条件参数，顶空条件参数研究涉及样品溶剂极性、沸点、顶空平衡温度、平衡时间、顶空取样量等因素的影响［2］。分析结果的准确度，灵敏度和精密度与各个条件参数的选择均有关。因此系统适应性测试［3］，是顶空气相色谱分析方法研究中的不可少的部份。它可以核查顶空气相色谱系统的分析结果是否稳定可靠。按本文研究选择的条件参数进行分析，由谱图可测出，任何两个组份的分离度R值都大于1.5。从六次随机的进样获取的各检测组分的保留时间见表二, 其相对标准偏差小于2.0%。测试结果表明本分析方法满足此药品中挥发性残留有机溶剂分析的系统适应性要求。
表2：挥发性有机溶剂组份保留时间、相对标准偏差及沸点，(n=6)
Tab 1: residual organic volatile dissolution media
(RT：retention time， RSD：relative standard deviation， BP：boiling point)
残留挥发性有机溶剂
residual organic volatile
dissolution media    保留时间(min)
retention time     相对标准偏差relative standard deviation%    沸点（℃）boiling point
methanol    甲 醇    2.35    1.99    64
acetone    丙酮    4.23    1.56    55
dichloromethane    二氯甲烷    4.96    1.02    40
1-propanol    正丙醇（内标）    5.81    1.35    97
benzene    苯    7.66    0.91    80
toluene    甲苯    11.25    0.85    110
2 结 果 与 讨 论
2.1 采用上述条件顶空进样分析测定药品中的残留挥发性有机溶剂气相色谱结果，见谱图一。









图1：药品中残留溶媒气相色谱图
Fig.1: Gas chromatogram of residual dissolution media in pharmaceuticals

2.2 精密度及回收率测试见表三。由分析结果可以得出，采用内标与外标结合的方法定量，避免分析中残留有机溶剂挥发量难以控制的问题，分析结果显示顶空进样毛细管气相色谱是一种简便、快速（色谱分析仅13min）、准确、重现性好的分析药品中挥发性残留有机溶剂的方法。
表3 ： 样品测定及精密度和回收率测试结果(n=6)
Tab 3 : Results of samples determination and recoveries:
残留挥发性有机溶剂组分
residual organic volatile
dissolution media components    测定结果assay results (ppm w/w)    相对标准
偏差(RSD%)    加入量added
(ppm)     测出量determined
(ppm)    回收率recovery
(%)
methanol    甲 醇    65.37    2.36    50    50.52    101.04
acetone    丙酮    43.52    2.23    50    49.92    99.84
dichloromethane    二氯甲烷    37.61    2.52     50    50.16    100.32
benzene    苯    15.73    1.93    30    30.32    100.40
toluene    甲苯    25.27    1.75    30    29.81    99.37

参考文献：
１、    李眉 马玉楠．简介ICP关于药品中溶剂残留量的指导原则．药学进展，1998，1（3）：119-120
２、    林炳承 等. HS-6B顶空进样器的性能考察及其应用. 分析测试通报，1991，10（5）：17-21
３、    USP. X X Ⅲ. (1995)

Determination of Residual Dissolution Media in Pharmaceuticals by Headspace Capillary Gas Chromatography

Deng Qing
Yunnan Province Analytic and Testing Research Institute, Kunming, 650051

Deng Lang
Yunnan University Yunnan Institute of Microbiology, Kunming 650091


Abstract Objective : To establish the method for determination of residual organic volatile dissolution media in pharmaceuticals. Method: Headspace capillary gas chromatography only introduces volatile and semi-volatile components onto the column, which prevents contamination of the system with non-volatile material. Sample pretreatment is simplified. Analysis efficiency is enhanced. In the present work, headspace injection, capillary analyst and determination by the internal standard and the external standard method was employed together. Results: The recovery were 99.37─101.04% and the relative standard deviations were 1.75─2.36%. Conclusions: This method is fast, reproducible and accurate. Therefore, the automatic headspace gas chromatographic is an ideal approach for the analysis determination of residual dissolution media in pharmaceuticals.

Keywords: Headspace gc, quantitative analysis, pharmaceuticals, residual dissolution media