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为什么毛细管电泳电流持续稳定降低？

gabyg

2014/05/11

毛细管电泳（CE）

做Beckman毛细管电泳仪器校验，按照《JJG 964-2001 毛细管电泳仪检定规程》检定：

波长254nm ，75μm × 40c m毛细管，柱温25℃，电泳电压为15 kV。选择气压8 kPa，进样时间3s(气压进样)。用20 mmol/L的磷酸氢二钠作为缓冲液，取质量浓度为2 X 10-6 g/ml的维生素B6溶液进样。

校验用的毛细管有一年没用了，用之前活化了一下。电流图如上，电流持续降低，波动，然后又会陡然升至正常电流40μA。还有，进第一针时很正常，进第二针时电流就上不去了。

后来买了新毛细管，结果还是这样。

对毛细管还不太了解，请教大家这是怎么回事？

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nini2006

第1楼2014/05/12

看起来像有气泡的样子，缓冲溶液有没超声呢？

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该帖子已被版主-wy20071722加3积分，加2经验;加分理由:应助

gabyg

第2楼2014/05/12

超声了。

还有，进第一针时很正常，进第二针时电流就上不去了。
nini2006(nini2006) 发表:看起来像有气泡的样子，缓冲溶液有没超声呢？

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nini2006

第3楼2014/05/12

那可能是毛细管出口端有细微断裂。可以检查一下。另外用碱多冲一冲。不过，如果是曾经用过让后又长时间放置的毛细管其实已经不适合再用了，换根新的吧。
gabyg(v2716616) 发表:超声了。

还有，进第一针时很正常，进第二针时电流就上不去了。

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wy20071722

第4楼2014/05/15

换个新管可能就好了。溶液要过滤、超声。

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gabyg

第5楼2014/05/18

做另一个样时，基线一直往上飘，从头飘到尾，怎么回事啊？
nini2006(nini2006) 发表:看起来像有气泡的样子，缓冲溶液有没超声呢？

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gabyg

第6楼2014/05/18

还有个很严重的问题，基线经常在零以下，紫外检测器。
nini2006(nini2006) 发表:看起来像有气泡的样子，缓冲溶液有没超声呢？

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nini2006

第7楼2014/05/18

[div]原文由v2716616发表：

还有个很严重的问题，基线经常在零以下，紫外检测器。[/div]灯用了多长时间？是不是快到寿命了呢？

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gabyg

第8楼2014/05/20

已经换了新毛细管，问题还没有解决，电流还是这样，愁死我了。
nini2006(nini2006) 发表:那可能是毛细管出口端有细微断裂。可以检查一下。另外用碱多冲一冲。不过，如果是曾经用过让后又长时间放置的毛细管其实已经不适合再用了，换根新的吧。

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ericwong

第9楼2014/05/21

新毛细管做了什么样的处理？
gabyg(v2716616) 发表:已经换了新毛细管，问题还没有解决，电流还是这样，愁死我了。

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beyond1977

第10楼2014/05/22

应助达人

最好再提供多点数据，比如第一针正常的图谱，还有你做样的程序，你说第一真好，第二针就不行了，会不会是你的冲洗程序有问题？

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