毛细管电泳(CE)
nini2006
第1楼2014/05/15
是不是样品峰和marker峰没分开?你不加marker直接跑样品试试看情况如何。
CEcret
第2楼2014/05/15
这种情况我遇到过几次,提供几点思路供你参考:1。你所测定的蛋白是否在280nm有明显吸收?有一些蛋白,如酪蛋白等,这个波长下没有吸收的2。你的样品浓度是否合适?如果你的样品蛋白浓度在5~10mg/mL,那么需要加入10uL左右每240uL。3。你的样品有没有脱盐?一般来说盐浓度一定要小于50mM。
君and
第3楼2014/05/16
嗯,混合在仪器跑了,即Marker7.0、55.、4.1和样品混在仪器跑了,只有3个Marker的峰
第4楼2014/05/16
哦,谢谢啦,我今天排查一下原因看看。
第5楼2014/05/16
又出现新问题了,每一针样运行至聚焦之后开始分离时,就出现对话框The high voltage system was unable to deliver the required current,是什么原因啊?
plssunyudong
第6楼2014/05/16
你的进样方式是什么,电动进样会导致淌度低的样品缺失,可以试试流体力学进样
第7楼2014/05/17
说明有漏电现象存在。。。检查一下你的毛细管有没有问题,如果没有问题,那么请清洗电极。做等电聚焦,由于采用的溶液里面polymer和尿素浓度都比较高,因此容易析出结晶,造成局部漏电。
第8楼2014/05/19
进样方式是压力进样啊,25psi,99.9sec
第9楼2014/05/20
谢谢,我昨天把待测蛋白的浓度加大到10mg/ml, 跑了一个不加等电点Marker的样品,有吸收峰,谢谢啦。
第10楼2014/05/20
谢谢,我昨天把待测蛋白的浓度加大到10mg/ml, 跑了一个不加等电点Marker的样品,有吸收峰,谢谢啦。但是新的问题又来了,我用了三个Marker 7.0, 5.5, 4.1和目的蛋白放在一起进样,出现四个峰,我的目的蛋白理论等电点为4.8,应该是第3个峰,但是现在是第2个峰,是怎么回事啊?
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