| 看了一篇文章，做植物内生菌分离之后，再筛选可产生PQQ（吡咯并喹啉醌）的内生菌的步骤如下 初筛：选择加入甲醇后发酵液变为红色的内生菌（说明选择是甲醇利用型内生菌） 复筛：原文如下 ”PQQ 的光谱法分析参照杨延新的方法[53]进行，将 PQQ 产物分别加入石英和玻璃比色杯中进行紫外扫描，以 MPQ 培养基加入 3 倍体积甲醇液为对照，记录 D326nm和 D400nm值，计算OD326nm-OD400nm值用以检测 PQQ 含量“ 不明白之处是为何减去400nm处的值。 随后查杨延新的文献上又有如下解释 “光谱法是以 D326nm值与 D400nm值的差值来检测PQQ 含量。 PQQ 在 247 和 330 nm 左右有 2 个特征吸收峰[8]。考虑到蛋白质和核酸的干扰，排除 247 nm的吸收峰，选择 330 nm 吸收峰的峰值吸收，即 326nm。 400 nm 为末端吸收，利用 326 与 400 nm 的差值可以消除系统误差。” 不明白到底什么是末端吸收，查了相关解释也是一懂半懂，400nm处究竟什么引起系统误差？？后来问过别人，说是因为如果做全波长扫描的话，在400处有吸收峰，400处值不是最低，所以要减去400的值。 可是明明是326是PQQ的最大吸收峰，而要测得也只是PQQ而已，到底为何减去400的值，好纠结，不懂啊~~~~~对紫外吸收这块实在很初学，麻烦高手解释一下~~~~谢谢~~~ |
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