细菌生化鉴定试验你了解几何？——三糖铁培养基的灵活应用

细菌在生长繁殖过程中要进行一系列复杂的生化反应，该过程的分解代谢是将复杂的有机物降解为结构简单的化合物；合成代谢则是将小分子化合物合称为复杂的菌体成分。分解和合成代谢同时进行，随之产生多种代谢产物，利用生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢产物以及参与代谢过程的不同酶类，对鉴定细菌、细菌致病性的研究以及医学应用中均具有重要作用。利用各种生化方法检测各类细菌的代谢产物，统称为细菌的生化方法。在临床细菌检验工作中，除根据细菌的形态、染色、培养特性进行初步鉴定外，对绝大多数分离的未知菌的属、种鉴定，主要通过生物化学试验。因此细菌的鉴定中，生化试验是非常重要的。而三糖铁培养基是肠道菌鉴定的第一步生化试验，因此，三糖铁培养基在 肠道菌鉴定中起到至关重要的作用。那么，你对细菌鉴定的生化试验的三糖铁培养基了解多少了，笔者就这方面的知识，做一总结。

糖类发酵试验
（1）原理：糖类是作为碳源和能量来源提供细菌合成菌体成分必需的原料，各类细菌含有发酵不同糖类的酶，故分解糖类的能力各不相同，有的能分解多种糖类，有的仅能分解1-2种糖类，还有的不能分解。细菌分解糖类后的终末产物亦不一致，有的产酸、产气，有的仅产酸，故可利用此特点以鉴别细菌。
（2）三糖铁培养基：含三种糖（蔗糖1%，乳糖1%，葡萄糖0.1%），三糖铁培养基是下层为半固体培养基, 并在下层含蔗糖, 上层含乳糖、葡萄糖, 同时上下层用两种不同颜色的指示剂, 颜色区分明显, 更便于观察。若细菌分解糖类产气，则培养基断裂或者有气泡产生。若细菌产生硫化氢时与培养基中硫酸亚铁作用，形成黑色的硫化亚铁。
（3）方法：将分离的纯菌细菌，以无菌操作穿刺划线接种到三糖铁培养基中，置培养箱中37℃培养数24小时，观察结果。
（4）结果：经37℃培育8小时, 斜面和底层均变为黄色（酸性A/A）,12 小时斜面变为红色(碱性K), 底层仍为黄色（K/A） ,24h-48h都是K/A。而采用厌氧培养, 培养8-48小时, TSI斜面和底层始终为黄色（A/A）。若不分解，培养基中除有细菌生长外，无任何其他变化。
接种的细菌，若能分解培养基中的糖类产酸时，培养基中的指示剂呈酸性反应。若产气可使培养基内有裂隙等现象。若产生硫化氢，则培养基变成黑色。
（5）应用：是鉴定细菌最主要和最基本的试验，特别对肠杆菌科细菌的鉴定尤为重要。
结果：结果见表1





三糖铁的生化反应的形式 左1为产硫化氢，中间位K./A产气。右1为A/A。



这个是配制好的三糖铁培养基（TSI）



这个事配制三糖铁培养基的干粉培养基。

结论：三糖铁培养基 是一种常用的肠道菌鉴别培养基，在肠道菌的鉴定中起到关键的第一步生化鉴定作用，如果在细菌鉴定试验中正确合理的应用，会对细菌的鉴定带来一定的作用，但是如果运用不当，怎会给鉴定带来不小的麻烦。所以合理应用三糖铁培养基在细菌鉴定中的作用至关重要。
参考文献：
[1]中华人民共和国国家标准《食品微生物学检验》.中国标准出版社.2012年8月第一版。
[2]徐建国等编著《现场细菌学》.科学出版社.2011年2月第一版。
[3]张卓然等编著《临床微生物学和微生物检验》.2006年1月第三版。

“三糖铁培养基是下层为半固体培养基，并在下层含蔗糖，上层含乳糖、葡萄糖，同时上下层用两种不同颜色的指示剂。”，请问出处在哪，制备细节有哪些？