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高效液相色谱法检测女贞子药材中女贞苷含量

前处理综合讨论

  • 高效液相色谱法检测女贞子药材中女贞苷含量


    药材女贞子为木樨科植物,具有滋肝肾、明目黑发,也可治疗眩晕耳鸣、腰膝酸软等症状。其中女贞苷是女贞子中重要成分之一。相应饮片和药材都要求检测女贞苷含量。

    以下的方法采用的是高效液相色谱法,检测的是女贞子药材中女贞苷含量。

    实验部分

    原理


    取适量样品粉碎、溶解、超声提取、定容、滤过,由进样系统进样,色谱柱分离,紫外检测器检测,保留时间定性,峰面积定量计算。

    仪器及试剂

    仪器:
    高效液相色谱仪(紫外检测器),超声波清洗仪,粉碎设备,三号筛,电子天平,具塞锥形瓶,溶解过滤器,针筒式过滤器

    试剂:甲醇(色谱纯),超纯水,稀乙醇

    样品制备

    对照品溶液的制备:
    精密称取女贞苷对照品12.5mg50ml容量瓶中,加甲醇制成0.25mg/ml女贞苷溶液,备用。

    供试品溶液的制备:取女贞子药材样品适量,充分粉碎后过三号筛,准确称取过筛后的粉末0.5g,置于具塞锥形瓶中,精密加入稀乙醇50ml,称定重量,超声波超声30min,待样品完全溶解后,放冷,再称定重量,用稀乙醇补充减少的重量,摇匀,微膜滤过,待测。

    色谱条件

    检测器:紫外检测器

    色谱柱:C184.6 X 250mm5um

    波长:224nm

    流动相:甲醇:水=4060V:V

    流速:1.0ml/min

    柱温:30

    进样量:5ul

    对照品溶液色谱图:


    供试品溶液色谱图:


    看看这效果,很羡慕吧,峰形、分离度都很完美吧。

    该方法检测女贞子药材中女贞苷含量操作简单、方便,实验快速,结果准确、可靠,是一种坚持女贞子的好方法。

    注意的是样品前处理时如果取样量较大或样品粉碎的不够充分,样品提取时可能不能提取完全。那样的话一是样品量要适中,不要太多;二是样品粉碎的要尽量充分;三是超声波提取时间要适当长一些,或提取时温度湿度高一点,或分成几次或几批提取等。

    另外这个样品杂质和目标物干扰物都较少,检测时可以适当考虑下缩短检测时间的问题,比如适当增加流动相中甲醇含量,适当升高色谱柱温度控制等。下面我们就看看流动相甲醇:水=50:50,柱温40℃的效果吧。

    对照品溶液色谱图:

    供试品溶液色谱图:


    效果很好吧,这种方法我们在检测时是不是可以考虑下。哈哈,经验之谈,祝大家工作顺利,天天开心!

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  • 冰火女孩

    第1楼2014/10/19

    峰型分的很漂亮.

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  • 999youran

    第2楼2014/10/19

    样品的前处理很重要

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  • 我是风儿

    第3楼2014/10/20

    应助达人

    分离效果不错,而且干扰也少

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