液相色谱比别人之前做的少一个峰……

两峰之间的分离度太差了，柱效变差很可能会重合。

应助达人

（1）图1和图2之间的保留时间相差很大，如果是调了流动相比例的话，很可能是两个峰重合，但不排除其他可能，比如待测成分的性质发生变化。为确定原因应该尽量保证所有色谱条件的一致。
（2）图1和图3，忽略掉保留时间的差异，单看峰形，前后两个峰的面积大小差异也比较明显，如果样品来源一致应该不会出现这种问题。而样品中究竟有几个成分，应该出几个峰也不得而知。
建议：色谱条件保证统一，个人认为应该先采用之前的条件，保留时间定在12 min左右，确定对照的峰究竟是怎么样的，再做下一步打算。

应助达人

是不是色谱条件前后不一致了？

之前确实分离度不好，但是公司还是用了原来的方法，有效峰是后面的那个。

谢谢你的回复！图一是以前别人做的，图二和图三是我昨天做的。方法都一样，可能不是用的同一根柱子。柱子最近也不太好用，柱压不稳，而且之前有漏液。按道理是要有两个峰的，虽然说图一的分离效果不理想，但是还是有两个峰啊，我现在最郁闷的是对照品的两个峰不见了！

是一样的啊？同样的分析方法！

应助达人

分析方法一样，可能就是色谱柱的原因了，保留时间变化很多；柱压不稳有色谱柱的关系不是很大，还需要检查仪器是否存在故障

换了根柱子，出峰了！感谢大家。！

应助达人

是不是没分开