样品稀释液与流动相不一致会产生溶剂峰实例分享

应助达人

一般和初始流动相一致

我觉得，稀释液和流动相极性尽量保持一致。但是有时候样品用流动相溶解有困难，需要更换溶剂，这时候也要尽量选择极性与流动相接近的稀释剂。若极性相差太大，会导致保留时间和峰形的改变。甲醇/水=1/4和乙腈/水=1/4极性相差不太大，所以可能图谱体现不出太大差别。若用纯甲醇或乙腈做稀释液，估计峰形和保留时间会有很大变化

应助达人

如何判断溶剂的极性呢

应助达人

上图反映了以下几个问题：1：乙腈和甲醇两种流动相中，检出峰的高度不同。原因：在波长相同的情况下，甲醇的吸光强度比乙腈的吸光强度大，因而，在以甲醇做流动相时，检出峰的高度比乙腈做流动相时变低。2：乙腈和甲醇两种流动相中，检出峰的保留时间不同。原因：甲醇的极性比乙腈大，在反相色谱分析中，极性越小洗脱能力越强，样品出峰时间越短，因而，在以乙腈做流动相时，检出峰的保留时间比甲醇做流动相时小。3：吸光度大的的溶剂（甲醇）稀释样品，在吸光度小的流动相（乙腈）中，溶剂峰显示更突出（图二）。原因：甲醇的吸光度比乙腈大。

极性大小：甲醇 >乙腈

应助达人

若用纯甲醇或乙腈做稀释液，要考虑溶剂在流动相中的扩散效应，会使溶剂峰显示更加突出。