中药材红花高效液相色谱法检测
中药材红花为菊科植物红花的干燥花,夏季花由黄变红时采摘,阴干或晒干。
该药品具有活血通经、去瘀止痛、消肿润燥。用于治疗经闭、痛经、恶露不行、痈肿止痛、胸痹心痛、瘀滞腹痛,胸胁刺痛、跌打损伤、疮疡癥瘕、肌肉劳损、冠心病及多种妇科病等。
红花是生产多种药品的原材料,主要药物成分要严格控制。下面我们就采用高效液相色谱法对红花药材中重要成分羟基红花黄色素A和山柰素进行检测。
首先介绍下羟基红花黄色素A的检测。
对照品溶液制备:精密称取羟基红花黄色素A对照品5mg于50ml容量瓶中,加25%甲醇至刻度,配制成每0.1mg/ml羟基红花黄色素A对照品溶液,备用。
供试品溶液制备:取红花药材适量,充分粉碎后过三号筛(药典筛),精密称取过筛后粉末0.5g,置于具塞锥形瓶中,精密加入25%甲醇50ml,称定重量,超声处理40分钟,放冷,再次称定重量,用25%甲醇补足减少的重量,摇匀,0.45um有机相微膜滤过,待测。
色谱条件
检测器紫外检测器
色谱柱:C18
检测波长:403nm
流动相:甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液(26:2:72)
流速:1.0ml/min
柱温:30℃
进样量:10ul
对照品色谱图:
供试品色谱图:
接下来介绍下山柰素检测。
对照品溶液制备:精密称取山柰素对照品1mg于100ml容量瓶中,加甲醇至刻度,配制成每0.01mg/ml山柰素对照品溶液,备用。
供试品溶液制备:取红花药材适量,充分粉碎后过三号筛(药典筛),精密称取过筛后粉末0.5g,置于具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25ml,称定重量,加热回流30分钟,立即冷却,转移至25ml容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,0.45um有机相微膜滤过,待测。
色谱条件
检测器紫外检测器
色谱柱:C18
检测波长:403nm
流动相:甲醇-0.4%磷酸溶液(52:48)
流速:1.0ml/min
柱温:30℃
进样量:10ul
对照品色谱图:
供试品色谱图:
由于红花中这两种主要药物成分检测的条件相差太大,同一检测方法检测难度可见一般,准确度、灵敏度、稳定性等重要指标很难实现。分开检测虽然多花了点时间,但为了达到准确度、精密度、分离度、灵敏度等重要指标,这种做法还是非常必要的。
通过以上实验过程和结果,我们可以看出该方法非常适合该药品的检测,结果准确、可靠,操作方便、简单,实用性很强。