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SKALAR连续流动分析仪测定乳制品中蛋白质含量

兰博周

2014/12/31

乳制品检测

蛋白质是生命的基础 , 人体的重要组成成分。它不仅是一种重要的供能物质 , 更主要的作用是促进生长发育和新陈代谢。但婴幼儿过量的摄入蛋白质会增加肾脏的负担,因此蛋白质的摄入要根据营养状况、生长发育要求达到供求平衡。乳及乳制品是婴幼儿摄取蛋白质的主要来源, 安徽阜阳 “毒奶粉 ”事件就是因为婴幼儿食用了蛋白质含量极低的劣质奶粉 ,所以对乳及乳制品中蛋白质含量的监控极为重要. 目前我国测定乳及乳制品中蛋白质的方法主要为凯氏定氮滴定法、凯氏定氮比色法, 但是这两种方法繁琐、费时。连续流动分析法测定乳及乳制品中蛋白质含量,对于批量样品,该方法具有很大的优势，不但简便快捷、而且准确度和灵敏度度也有很大的提高。

1.实验部分

1. 1 仪器与原理

SAN+ +四通道连续流动分析仪 (荷兰SKALAR公司)蛋白质分析模块。原理：自动测定蛋白质基于改良后的贝特勒反应即经过相互分离后对氨进行分析。消化后的样品用酸式盐溶液稀释定容,铵盐通过与水杨酸钠反应氯化为一氯化胺, 通过氧化和氧化偶合后形成绿色配合物,反应是以硝普钠为催化剂,次氯酸钠溶液被用于提供氯, 在波长630 nm处检测。

1. 2样品前处理

准确吸取液态奶 (或称取固态奶 ), 同时准备空白样分别置于 250 mlVELP消化管中 , 加入以1: 10混匀的 CuSO4和K2SO4混合催化剂, 再加入20 ml浓 H2SO4,于蛋白质自动消化仪中消化，最后消化至蓝绿色, 冷却至室温后用蒸馏水定容至100 ml。

1.3试剂和标准的配置

酸性氯化钠溶液: 称取100 g氯化钠用800 ml水溶解, 加入7. 5 ml浓硫酸, 用水定容到1000 ml , 加入3. 0 ml0. 3% Brij35混匀。

缓冲液: 称取5 0 g酒石酸钠钾和14. 2 g磷酸氢二钠用800 ml水溶解, 加入54 g氢氧化钠溶解, 用水定容到1 000 ml, 加入3. 0 ml0. 3% Brij35混匀。

水杨酸钠溶液: 称取150 g水杨酸钠和 0. 3 g硝普钠, 用 800 ml水溶解后定容至1000 ml。

次氯酸钠溶液: 量取2. 4 ml次氯酸钠, 用80 ml水稀释后定容至100 ml。

标准曲线浓度：40ppm，100ppm，200ppm，300ppm，400ppm,500ppm。

2结果与讨论

2.1标准曲线测定

根据实验结果可知，溶液浓度和数字信号呈现较好的线性关系，所得曲线拟合得标准方程为y=11421.01872x+20507.46875，相关系数r=0.9991，呈现出很好的线性关系其中y为仪器响应值，x为蛋白质浓度。

2.2样品测定

本次样品均是牛乳，从下图和表中可知，样品中的蛋白质含量都符合标准，未出现异常值。仪器也比较稳定，相对于传统国标法来说连续流动有明显的优势。这里我们仅对乳与乳制品中蛋白质含量进行了测定 , 其中蛋白质的种类和单体含量的测定却有待进一步深入研究。此外，除测定牛乳的蛋白质外, 本法还可尝试推广到其他保健食品、植物蛋白饮料等的蛋白质测定。

3结论

连续流动分析法测定乳制品中蛋白质，方法简便、快捷、准确、灵敏度高、适用性强，尤其是对于批量样品优势更加明显。

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李三疯

第1楼2014/12/31

应助达人

线性做得蛮好啊

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兰博周

第2楼2014/12/31

一般一般，现在只要仪器给力基本都能做到三个999，好多都能做到1.0呢
李三疯(lm2001-66) 发表:线性做得蛮好啊

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zhouzhou65

第3楼2014/12/31

我们蛋白质分析模块基本都不太用

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兰博周

第4楼2014/12/31

我们也不怎么用，样品少基本都用凯氏定氮仪
zhouzhou65(v2930802) 发表:我们蛋白质分析模块基本都不太用

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999youran

第5楼2014/12/31

分离的很好啊

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暗夜精灵

第6楼2014/12/31

同一类的多了，就是上一些数据。

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穿越时空

第7楼2014/12/31

一次实验就下结论了？

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zyl3367898

第8楼2014/12/31

应助达人

流动分析是消解后自动一个个分析吗？

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Franklin-学

第9楼2014/12/31

有图有真相，很好啊

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兰博周

第10楼2014/12/31

也是刚做上蛋白质定量，希望与大家一起交流
暗夜精灵(jbcng) 发表:同一类的多了，就是上一些数据。

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