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CE分离花青素

  • 安静地生活
    2015/01/21
  • 私聊

毛细管电泳(CE)

  • CE分离花青素用的是酸性条件,磷酸缓冲液pH2.1添加CTAB 0.25mM,-25kV ,520nm PDA检测器,毛细管内径75um,长72cm.结果显示,电流-200mA,与文献报道-70mA相差很大,文献用的毛细管内径50um,会造成这么大的电流差异吗?求解!
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  • CEcret

    第1楼2015/01/21

    你用的毛细管内径75um,原则上电流会比50um的翻倍还要多一些。再加上长度测量有点误差,你的电流并不算离谱。
    但是对于一个稳定的方法来说,它的电流是不应该太大的。因为焦耳热会影响分离的重现性。
    我建议你换成50内径的管子。

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  • nini2006

    第2楼2015/01/21

    CEcret专家说得很对。内径变化电流也会变化非常大。分离小分子有机物,一般50 um的用的比较多。

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  • 安静地生活

    第3楼2015/01/22

    感谢!今天将缓冲液浓度降低了1倍,同时将样品用十分之一的缓冲液稀释一倍,结果有好一点的分离,但在15分钟以后,出现基线上漂的现象,何解?

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  • nini2006

    第4楼2015/01/22

    基线漂移很正常。有时候柱子状态不太好也会这样,多冲一冲,或多走几针有可能就好了。

    安静地生活(v2972267) 发表:感谢!今天将缓冲液浓度降低了1倍,同时将样品用十分之一的缓冲液稀释一倍,结果有好一点的分离,但在15分钟以后,出现基线上漂的现象,何解?

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  • CEcret

    第5楼2015/01/22

    你用50内径的毛细管,电流直接减半,分离度直接改善。

    安静地生活(v2972267) 发表:感谢!今天将缓冲液浓度降低了1倍,同时将样品用十分之一的缓冲液稀释一倍,结果有好一点的分离,但在15分钟以后,出现基线上漂的现象,何解?

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  • 安静地生活

    第6楼2015/01/28

    换了50内径的毛细管,今天再看看

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  • cpudaxiao

    第7楼2015/01/28

    建议把磷酸盐缓冲液的组成核实一下。一般用磷酸二氢钾,也有文献用生物培养用的PBS配方,有四五种盐吧。盐种类多,虽然是电中性,但是电流自然大。

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  • 安静地生活

    第8楼2015/01/29

    感谢,马上去核实!

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