为什么说ADME是C18柱之后的第二选择

第一选择虽然是C18色谱柱，但是在C18色谱柱保留、分离效果不好的情况下，不改变原有流动相，请使用ADME色谱柱进行分析吧！

为什么推荐使用ADME色谱柱分析呢？

刚才在介绍金刚烷的时候提到过，ADME色谱柱可以在反相模式下进行分析，并且具有其他色谱柱所不具备的特殊高表面极性和疏水性，可以用于尝试分析目前已有的色谱柱所不能实现的分析。

在原流动相条件下，将色谱柱更换为CAPCELLPAK ADME色谱柱。

刚才，使用其他公司的高极性C18色谱柱未达成分离，而改变流动相条件后使得分析时间延长了3倍，并且峰强也变弱了。

但是，在相同流动相条件下，将色谱柱变更为CAPCELL PAK ADME后，如图所示，只需要10分钟就能达成良好分离。

这是因为，在刚才的参数图中可以看出，CAPCELL PAK ADME色谱柱具有其他色谱柱所不具备的与样品之间的特异的相互作用。在第一选择色谱柱未能取得分离的情况下，在原有流动相条件下，请使用CAPCELLPAK ADME色谱柱进行尝试！

刚才我们看了表面极性与疏水性的参数图，那么接下来让我们看看能显示填料性能的10种标准物质的检测色谱图吧！

虽然本公司的填料证明书里已经有相关的应用数据资料，作为评价各种色谱柱的方法，我们使用这10种样品及如下色谱条件，对色谱柱填料进行了评价。

其他公司色谱柱也使用同样方法进行评价。

实际得到的结果请参考幻灯片上的色谱图。

10种标准物质中，具有特征性出峰行为的物质是苯甲酸甲酯和苯。

使用常规色谱柱分析时，出峰顺序为苯甲酸甲酯在前，苯在后；而CAPCELL PAK ADME S3色谱柱，由于苯甲酸甲酯具有极性部位，因此保留较强。

于是，使用CAPCELL PAK ADME S3色谱柱分析时，苯出峰在前，苯甲酸甲酯出峰在后，和常规色谱柱有所不同。

关于这一点，我也将进行详细说明。

我们从刚才的色谱图以及各种参数，可以计算出色谱柱的疏水性和表面极性。

疏水性是由苯和甲苯的分离系数计算得出，表面极性是由甲苯和苯甲酸甲酯的分离系数计算得出。

在这里，用CAPCELL PAK C18 MGII色谱柱的参数进行比较。MGII色谱柱的疏水性是2.10，CAPCELL PAK ADME色谱柱为1.90。

MGII色谱柱的表面极性是0.43，CAPCELL PAK ADME色谱柱为0.75。

数值越高，则具有更高的识别能力，色谱峰的分离程度越高。

让我们再看一下参数图。

CAPCELL PAK ADME色谱柱的坐标点在这里。

它处于和其他类型的色谱柱所不同的位置，和其他反相色谱柱进行比较，会发现它的分析范围更广，擅长分析极性化合物。

请再看一下实际得到的色谱图。

具有其他类型色谱柱所不具备的特殊的表面极性和疏水性的CAPCELL PAK ADME S3色谱柱，对于高极性化合物1-4的保留比常规C18色谱柱强，而且ADME色谱柱所得到的萘的色谱峰与其他类型的色谱柱保留时间相近。这表示CAPCELL PAK ADME色谱柱既能保留疏水性化合物，也能保留极性化合物。这是因为官能团的差异（笼状的金刚烷基和直链的十八烷基）所带来的影响。

最后介绍一下ADME色谱柱的应用数据。

那么，这张参数图我们今天见到几次了？这是第三次。

将ADME色谱柱与常规C18色谱柱进行比较的同时，为大家介绍应用数据。

在C18色谱柱不能取得保留和分离的情况下，可以使用相同的流动相条件，将ADME色谱柱作为第二选择进行分析。

在介绍ADME色谱柱的应用数据之前，让我先介绍一下使用PC HILIC色谱柱进行分析的应用数据。

核苷是由碱基和糖（核糖）形成的极性物质，因此可以使用HILIC模式进行分析。

对于生物样品中的极性化合物进行分析时，有以下几点需要注意。

极性化合物在反相模式下会较早溶出，所以不会有问题；但是在HILIC模式下，因为溶出较慢，因此不知道分析时间设定为多少合适。

因此，极性化合物在反相模式下进行分析比较好。

以下为ADME色谱柱对核苷类化合物进行分析的应用数据。

比较了CAPCELL PAK ADME、CAPCELLCORE ADME和常规C18色谱柱，可以观察到CAPCELL PAK ADME和CAPCELLCORE ADME色谱柱的特长。

首先，对于高极性的核苷进行分析，得到如下色谱图。

使用CAPCELL PAK ADME S5色谱柱进行分析，使高极性的核苷得到了充分的保留与分离。

而且分析时间可以控制的很精确。

接下来是鸟嘌呤核苷和2’-脱氧鸟苷的分析例子。

首先，使用常规C18色谱柱分析时，在死时间附近得到了保留和基线分离，但是由于保留较弱，在死时间附近会和杂质峰一起溶出、导致杂质峰和样品峰发生重叠。

而使用ADME色谱柱分析，由于它具有其他类型色谱柱所不具备的特异性相互作用，也就是发挥了羟基的识别能力（请回忆一下那张参数图），因此保留增强，同时分离度也提高了。

接下来是胞嘧啶核苷和2’-脱氧鸟苷的分析例。

胞嘧啶核苷在核苷类化合物中属于极性非常高的化合物。首先使用乙腈作为有机相，用常规C18色谱柱进行分析，没有实现分离。

之前也介绍过了，在相同流动相条件下，把常规C18色谱柱更换为ADME色谱柱，就可以像这样增强保留，提高分离度。

紧接着，将有机相变更为甲醇后，可以进一步增强保留，分离度也从3.59提高了2倍，变为7.28。

这可能跟甲醇是质子性溶剂而乙腈是非质子性溶剂有关。

对比常规C18色谱柱的出峰行为，虽然改变有机相后分离度也提高了，但是远不及ADME的效果好。

接下来是使用CAPCELL CORE系列色谱柱，对酪蛋白的胰蛋白酶水解产物的分析例。

CAPCELL CORE C18 S2.7和CAPCELL CORE MP S2.7两款色谱柱的保留行为基本相同，但是使用CAPCELL CORE ADME S2.7色谱柱分析时体现出了ADME的特长，分析范围更加广泛。

和上一张幻灯片相关，这是顾客反映的使用CAPCELL CORE ADME和CAPCELL CORE C18 S2.7两款色谱柱，对高亲水性的四肽和五肽进行分析的例子。

四肽具有细胞吸附性蛋白质所共有的细胞吸附活性配列（Arg-Gly-Asp）。（2013年进行了将具有细胞吸附活性的肽类化合物编入抗癌药物的研究。）

因此，这一类肽类化合物的分析变得尤为重要。

使用CAPCELL CORE ADMES2.7色谱柱进行分析，也发挥了ADME的特长，增强了保留与分离。

ADME色谱柱具有其他类型的色谱柱所不具备的表面极性和疏水性，因此对极性高的小分子肽类物质能进行有效的保留与分离。

接下来是有机酸的应用数据。

一般这样的有机酸（在这里分析二元羧酸）的极性很高，保留很困难。

在此对马来酸和富马酸进行分析。马来酸是富马酸的异构体，马来酸是顺式结构，富马酸是反式结构。

另外，他们的pKa值也不同，因此流动相的pH也会影响他们的出峰行为。

而且，马来酸有在分子内形成氢键的倾向，这也对它的保留造成影响。

使用CAPCELL PAK ADME S5色谱柱、在乙腈系统下，将流动相pH调整为3，对马来酸和富马酸进行分析。

结果如图所示，未取得分离。于是将有机相更换为甲醇。

将流动相调整为甲醇后，使用常规C18色谱柱分析依然未达成分离，但是使用CAPCELL PAK ADME S5色谱柱，则保留增强，且达到良好分离。

（对于这样的异构体，使用CAPCELL PAK ADME是否能达到有效分离，我们将对此进行数据的积累，继续研究。）

使用CAPCELL PAK ADME S3色谱柱和常规C18色谱柱对实际样品（尿、营养剂和天然物质）进行分析。

使用如下色谱条件，使用梯度洗脱进行比较分析。