CE-SDS检测，相同处理方法下标准品比样品峰低，可能有哪些原因

我的检测顺序是先走一针标准品，中间走样品，最后再走一针标准品。如果想判断该次检测结果是否可信，需要对标准品作哪些限定呢？比如限定迁移时间范围，主峰面积百分数等等。还有那些项目是需要作出规定的？

1.按照beckman试剂盒的说明书，CE-SDS实验一般不需要脱盐。不知道你的样品是不是盐浓度非常高？
2.用sample buffer置换后溶液，这个不太理解。是怎么置换呢？类似于换液的把蛋白从原来的缓冲液中置换到sample buffer中吗？如果必须要脱盐的话，建议先脱盐，然后测定脱盐后浓度，在按照比例加入sample buffer

如果你也用BECKMAN的试剂盒，建议按照附件里的说明书方法试试

我看beckman的IgG Purity Heterogeneity Assay_B25801AA要求里，样品浓度低于10mg/ml和buffer浓度超过50mM时需要脱盐，我不确定buffer浓度，但是样品浓度肯定低于10mg/ml，所以为了保险每次都是脱盐的，然后复溶于sample buffer。
如果不需要脱盐，为什么样品处理的时候要求加入100ug体积必须小于45ul，然后加sample buffer到95ul？

你的附件为什么下载不了呢？是随BECKMAN的仪器一起来的吗

zyma_100(v2681763) 发表:如果你也用BECKMAN的试剂盒，建议按照附件里的说明书方法试试

附件就是IgG Purity/Heterogeneity Assay Application Guide，我这边可以看的。里面说：Add from 50 to 95 μL of sample buffer to give a final volume of 95 μL，也就是sample buffer最少加50μL，样品最多45μL，按100 μg折算的话样品的最低浓度为2.3mg/ml。如果浓度不够需要浓缩一下。和需不需要脱盐没关系的。

那他要求的终浓度是1mg/ml.为什么要限定样品体积呢？如果我保证终浓度是1mg/ml，是不是可以加体积超过45μL，如果不可以，为什么？

sample buffer在整个体系中要有一定比例的，不能太少。终浓度是1mg/ml，但如果样品本来就是1mg/ml，怎么操作呢，难道直接进样？呵呵~表达能力有限，不知道您能否明白

明白了。因为原来做样品都是脱盐然后复溶于sample buffer的，所以对这个体积要求就觉得很困惑。那这个比例的大小会对结果产生影响吗，比如我不脱盐，sample buffer大概是50%，如果我脱盐后复溶于sample buffer，那几乎就是100%。会影响结果吗

zyma_100(v2681763) 发表: sample buffer在整个体系中要有一定比例的，不能太少。终浓度是1mg/ml，但如果样品本来就是1mg/ml，怎么操作呢，难道直接进样？呵呵~表达能力有限，不知道您能否明白