关于毛细管电泳缓冲液加药物的问题

晕，那么着急呢，到处发，呵呵。
站短里已经回复过你了：
文献的意思是药物和蛋白样品用缓冲溶液溶解进样。进样后在分离缓冲溶液中分离，分离缓冲溶液当然不能有你要分析的样品。

周末没人回就发了好几次。哈哈，见谅。

文献上说：以药物为添加剂加入运行缓冲液，这个是RL法。另外一种是将蛋白为添加剂加入运行缓冲液，即LR法。

您的意思是指先inject药物、再inject蛋白，然后在separate？separate两端为分离缓冲液，不应该加药物或蛋白？

我们现在是这样做的，inject蛋白，然后separate，separate两端的缓冲液里加入药物。

这种方法我了解一些，正确的方法是在冲洗以及运行的buffer中都加入药物，然后通过测算蛋白峰的淌度换算结合常数。

而重现性差是因为蛋白与毛细管内壁存在严重的吸附作用。你应当采用涂层毛细管或者动态涂层技术来抑制蛋白的吸附。

那就是说Inlet的A1，A2和outlet A1都应该要加入药物？之前试过动态涂层，用SDS，但是效果也不是很好。我们都用断了好几根柱子了，真捉急。。。用涂层管会好很多吗？

你的flushing buffer和running buffer，都要加入药物。

关于涂层管，基本你只能找到进口的商品管，缺点是价格相对较高，一旦断裂，管子就废了。

我个人比较喜爱动态涂层，我用过一种很有特色的动态涂层，用来分析蛋白和多肽效果很不错，你可以参看这个实例，上图是Borate100mM pH 9.3的结果，一个大鼓包，并且如果不加大进样量，很难能看到明显的峰；下图是采用动态涂层的技术，由于峰形大幅度改善，变得很窄，进样量也得以回归正常。如果你对这样的涂层技术感兴趣，可以私信我交流。

想起来了，你讲的这个方法应该是亲和毛细管电泳法。我们组之前有人用CZE做过蛋白质与药物的结合常数，用个透析袋做，通过测游离药物的浓度变化就可以计算出结合常数来了，特别简单。

没错的，就是亲和电泳