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色谱分析实例：有机酸分析——如何选择色谱柱

happytiankong1

2015/05/18

有机酸分析
有机酸是一类典型的可解离型有机化合物，通常具有较高的水溶性，它们的相对分子量处于几十～几百之间，因而色谱柱可以锁定在离子抑制色谱、离子对色谱或离子交换色谱，其中前两种用的均是反相色谱柱。
分析这类物质时，离子抑制色谱法是最常用的方法。
由于羧基的存在，有机酸的极性较强，为了使这类物质能被反相柱保留，流动相中会有较大比例的水，有时甚至用到100%水溶液；然而在水介质中有机酸会部分解离，每一种纯净物都会以两种甚至两种以上的形式存在，这是造成有机酸峰形变差的根本原因。
解决办法就是将流动相的pH值设定为酸性，以抑制羧基的解离，这样化合物以单一的未解离形式存在，疏水性增强，在反相柱上的保留也增大。pH值可参考解离性最强的有机酸的pK_a，通常流动相pH值比该化合物的pK_a小一个数量级，就能使每种化合物得到比较完美的峰形。
下面为迪马应用实验室做到一个具体应用：
迪马实验室 2012-06-06

基质：标准溶液
应用编号：101837
化合物：1. 草酸(Oxalic acid) 2. 酒石酸(Tartaric acid) 3. 苹果酸(Malic acid) 4. 乳酸(Lactic acid) 5. 乙酸(Acetic acid) 6. 柠檬酸(Citric acid) 7. 富马酸(Fumaric acid) 8. 琥珀酸(Succinic acid)
色谱柱：Inspire C18，150×4.6 mm, 5 μm (Cat#：81001)
流动相：25 mM KH2PO4, pH 2.5 流速：1.0 mL/min
柱温：室温
检测器：UV 210 nm 进样量：10 μL
文章出处：迪马实验室

图例：1. 草酸(Oxalic acid) 2. 酒石酸(Tartaric acid) 3. 苹果酸(Malic acid) 4. 乳酸(Lactic acid) 5. 乙酸(Acetic acid) 6. 柠檬酸(Citric acid) 7. 富马酸(Fumaric acid) 8. 琥珀酸(Succinic acid)

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夏天的雪

第1楼2015/05/19

应助达人

峰型很漂亮，而且分离度貌似也都很好

0

夏天的雪

第2楼2015/05/19

应助达人

峰型很漂亮，分离度也很好

0

happytiankong1

第3楼2015/05/19

峰型和分离度实验室做下来都不错，这款是色谱柱是迪马的一款高分辨率色谱柱
夏天的雪(bingwang228) 发表:峰型很漂亮，而且分离度貌似也都很好

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happytiankong1

第4楼2015/05/19

总体来说还不错，您有做过这个实验吗？
夏天的雪(bingwang228) 发表:峰型很漂亮，分离度也很好

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夏天的雪

第5楼2015/05/20

应助达人

恩，做过，这几种同时分离的
happytiankong1(happytiankong1) 发表: 总体来说还不错，您有做过这个实验吗？

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夏天的雪

第6楼2015/05/20

应助达人

有机酸对柱子有点挑。标样做起来容易些，样品容易有干扰，甲酸、酒石酸出峰早，乳酸乙酸许多柱子分不开
happytiankong1(happytiankong1) 发表: 峰型和分离度实验室做下来都不错，这款是色谱柱是迪马的一款高分辨率色谱柱

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分
该帖子已被版主-happytiankong1加10积分，加2经验;加分理由:感谢分享

happytiankong1

第7楼2015/05/21

是的，实际样品在做的过程中会受到一些杂质干扰，加大了分离的难度～
夏天的雪(bingwang228) 发表: 有机酸对柱子有点挑。标样做起来容易些，样品容易有干扰，甲酸、酒石酸出峰早，乳酸乙酸许多柱子分不开

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夏天的雪

第8楼2015/05/22

应助达人

是的，标准溶液还是比较好分的，样品会遇到问题
happytiankong1(happytiankong1) 发表: 是的，实际样品在做的过程中会受到一些杂质干扰，加大了分离的难度～

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hongyue

第9楼2016/04/13

实际样品测试时，前几分钟有杂质干扰的话，出峰会非常难看的，很分离开，能放个样品的图看看吗？

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吕梁山

第10楼2016/04/14

我见有机酸分析主要用离子色谱

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