毛细管电泳(CE)
szdavid1
第1楼2015/05/21
这是所用的方法,其中70PSI的压力改为了 40,各个过程时间延长了一些。
CEcret
第2楼2015/05/21
从瓶子的标签看,过期将近15年。据我个人所知那个时候的CESDS配方和现在的不同。从你的图谱来看,这些杂峰尖锐且很窄,感觉像是气泡。你在开始的时候有没有做preconditioning,以及分离过程有没有两段加压。如果能看到电流图,会对我们分析问题有所帮助
第3楼2015/05/21
谢谢!试剂过期好久,外单位要做样品,不太想再花近2万去买新的试剂盒了,所以,将近就着用用。另外,我试过不上样直接跑,结果没有这些峰,基本是平的一条线。然后我又用纯水上样,结果和上面差不多,感觉是只要有上样动作,不管是缓冲液还是水,就会出现上面的杂峰,也许真是哪里进的气泡。开始做过毛细管的预处理过一次,处理过程按说明书如下,这个处理每天都要进行吗?我看和走样的程序差不多,谢谢!电流图如下:
第4楼2015/05/21
从电流和图谱来看,跟正常的不一样。目前的试剂盒电流会在25~30uA之间,并且会有特征的倒峰出来。如果你在分离过程中两端加了压力的话,气泡原则上是应该没有什么影响的。
ericwong
第5楼2015/05/22
酸洗应该在碱洗之前吧?
nini2006
第6楼2015/05/22
首先应该先超声3-5分钟赶气泡,如果超声后还是有这样的峰说明这个试剂盒变质了。放了那么久,里面肯定长了很多比如微生物什么的有UV吸收的东西。建议不要再用了。
王2015
第7楼2015/05/23
啥都不说了,重新配buffer吧记得之前活化柱子冲冲冲,能够超声都超声
第8楼2015/05/25
多谢楼上各位,本人在深圳,有空欢迎到深圳来,请大家吃荔枝,现在刚开始上市我先重配一下 sample buffer 标签上有配方那个14-200 gel buffer 能自己配吗? 怎么配?
第9楼2015/05/25
Gel buffer的配方厂家是没有公开的。也就是说自己配不了。。。但是我们提供类似的产品,已经私信你。感兴趣可以联系。
第10楼2015/05/26
官方提供的试剂绝大多数都不会给出具体配方,其实也就是为了防止私自配制。
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