标准缓冲液pH值与温度对照表
温度 ℃ | 四草酸氢钾 0.05M | 邻苯二甲酸氢钾 0.05M | 混合磷酸盐 0.025M | 硼砂 0.01M |
5 | 1.67 | 4.00 | 6.95 | 9.39 |
10 | 1.67 | 4.00 | 6.02 | 9.33 |
15 | 1.67 | 4.00 | 6.90 | 9.28 |
20 | 1.68 | 4.00 | 6.88 | 9.23 |
25 | 1.68 | 4.00 | 6.86 | 9.18 |
30 | 1.68 | 4.01 | 6.85 | 9.14 |
35 | 1.69 | 4.02 | 6.84 | 9.11 |
常用缓冲溶液的配制方法
1． 甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）
X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升
pH | X | Y | pH | X | Y |
2.0 2.4 2.6 2.8 | 50 50 50 50 | 44.0 32.4 24.2 16.8 | 3.0 3.2 3.4 3.6 | 50 50 50 50 | 11.4 8.2 6.4 5.0 |
甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）
X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升
pH(20℃) | X | Y | pH(20℃) | X | Y |
2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 | 5 5 5 5 5 | 4.070 3.960 3.295 2.642 2.022 | 3.2 3.4 3.6 3.8 | 5 5 5 5 | 1.470 0.990 0.597 0.263 |
邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升
3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液
pH | 0.2mol/LNa2HPO4 （毫升） | 0.1mol/L 柠檬酸 （毫升） | pH | 0.2mol/LNa2HPO4 （毫升） | 0.1mol/L 柠檬酸 （毫升） |
2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 4.8 5.0 | 0.40 1.24 2.18 3.17 4.11 4.94 5.70 6.44 7.10 7.71 8.28 8.82 9.35 9.86 10.30 | 10.60 18.76 17.82 16.83 15.89 15.06 14.30 13.56 12.90 12.29 11.72 11.18 10.65 10.14 9.70 | 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 | 10.72 11.15 11.60 12.09 12.63 13.22 13.85 14.55 15.45 16.47 17.39 18.17 18.73 19.15 19.45 | 9.28 8.85 8.40 7.91 7.37 6.78 6.15 5.45 4.55 3.53 2.61 1.83 1.27 0.85 0.55 |
Na2HPO4分子量 = 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4-2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量 = 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液
pH | 钠离子浓度 （mol/L） | 柠檬酸（克） C6H8O7·H2O | 氢氧化钠(克) NaOH 97% | 盐酸（毫升） HCl（浓） | 最终体积（升）① |
2.2 3.1 3.3 4.3 5.3 5.8 6.5 | 0.20 0.20 0.20 0.20 0.35 0.45 0.38 | 210 210 210 210 245 285 266 | 84 83 83 83 144 186 156 | 160 116 106 45 68 105 126 | 10 10 10 10 10 10 10 |
① 使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
②
5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）
pH | 0.1 mol/L 柠檬酸（毫升） | 0.1 mol/L 柠檬酸钠（毫升） | pH | 0.1 mol/L 柠檬酸（毫升） | 0.1 mol/L 柠檬酸钠（毫升） |
3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 4.8 | 18.6 17.2 16.0 14.9 14.0 13.1 12.3 11.4 10.3 9.2 | 1.4 2.8 4.0 5.1 6.0 6.9 7.7 8.6 9.7 10.8 | 5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 | 8.2 7.3 6.4 5.5 4.7 3.8 2.8 2.0 1.4 | 11.8 12.7 13.6 14.5 15.3 16.2 17.2 18.0 18.6 |
柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。
6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L）
pH(18℃) | 0.2 mol/L NaAc(毫升) | 0.3 mol/LHAc(毫升) | pH(18℃) | 0.2 mol/L NaAc(毫升) | 0.3 mol/L HAc(毫升) |
2.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 | 0.75 1.20 1.80 2.65 3.70 4.90 | 9.25 8.80 8.20 7.35 6.30 5.10 | 4.8 5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 | 5.90 7.00 7.90 8.60 9.10 9.40 | 4.10 3.00 2.10 1.40 0.90 0.60 |
Na2Ac·3H2O分子量 = 136.09，0.2 mol/L溶液为27.22克/升。
7．磷酸盐缓冲液
（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2）
pH | 0.2 mol/L Na2HPO4 (毫升) | 0.3 mol/L NaH2PO4 (毫升) | pH | 0.2 mol/L Na2HPO4 (毫升) | 0.3 mol/L NaH2PO4 (毫升) |
5.8 5.9 6.0 6.1 6.2 6.3 6.4 6.5 6.6 6.7 6.8 6.9 | 8.0 10.0 12.3 15.0 18.5 22.5 26.5 31.5 37.5 43.5 49.5 55.0 | 92.0 90.0 87.7 85.0 81.5 77.5 73.5 68.5 62.5 56.5 51.0 45.0 | 7.0 7.1 7.2 7.3 7.4 7.5 7.6 7.7 7.8 7.9 8.0 | 61.0 67.0 72.0 77.0 81.0 84.0 87.0 89.5 91.5 93.0 94.7 | 39.0 33.0 28.0 23.0 19.0 16.0 13.0 10.5 8.5 7.0 5.3 |
Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液为85.61克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量 = 358.22，0.2 mol/L溶液为71.64克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量 = 156.03，0.2 mol/L溶液为31.21克/升。
（2）磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液（1/15 mol/L）
pH | mol/L/15Na2HPO4 (毫升) | mol/L//15KH2PO4 (毫升) | pH | mol/L//15Na2HPO4 (毫升) | mol/L//15KH2PO4 (毫升) |
4.92 5.29 5.91 6.24 6.47 6.64 6.81 6.98 | 0.10 0.50 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 | 9.90 9.50 9.00 8.00 7.00 6.00 5.00 4.00 | 7.17 7.38 7.73 8.04 8.34 8.67 8.18 | 7.00 8.00 9.00 9.50 9.75 9.90 10.00 | 3.00 2.00 1.00 0.50 0.25 0.10 0 |
Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05，1/15M溶液为11.876克/升。
KH2PO4分子量 = 136.09，1/15M溶液为9.078克/升。
8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M）
X毫升0.2M K2PO4 + Y毫升0.2N NaOH加水稀释至29毫升
pH(20℃) | X (毫升) | Y（毫升） | pH(20℃) | X (毫升) | Y（毫升） |
5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 | 5 5 5 5 5 5 | 0.372 0.570 0.860 1.260 1.780 2.365 | 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 | 5 5 5 5 5 5 | 2.963 3.500 3.950 4.280 4.520 4.680 |
9．巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃）
pH | 0.04M巴比妥钠溶液 | 0.2V盐酸 | pH | 0.04M巴比妥钠溶液(毫升) | 0.2N盐酸(毫升) |
6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 8.2 | 100 100 100 100 100 100 100 100 | 18.4 17.8 16.7 15.3 13.4 11.47 9.39 7.21 | 8.4 8.6 8.8 9.0 9.2 9.4 9.6 | 100 100 100 100 100 100 100 100 | 5.21 3.82 2.52 1.65 1.13 0.70 0.35 |
巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M溶液为8.25克/升
10．Tris–盐酸缓冲液（0.05M，25℃）
50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100毫升。
pH | X(毫升) | pH | X(毫升) |
7.10 7.20 7.30 7.40 7.50 7.60 7.70 7.80 7.90 8.00 | 45.7 44.7 43.4 42.0 40.3 38.5 36.6 34.5 32.0 29.2 | 8.10 8.20 8.30 8.40 8.50 8.60 8.70 8.80 8.90 | 26.2 22.9 19.9 17.2 14.7 12.4 10.3 8.5 7.0 |
三羟甲基氨基甲烷（Tris）HOCH2 CH2OH HOCH2 NH2 C
分子量=121.14;
0. 1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
11．硼酸–硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）
pH | 0.05M硼砂（毫升） | 0.2M硼砂（毫升） | pH | 0.05M硼砂（毫升） | 0.2M硼酸（毫升） |
7.4 7.6 7.8 8.0 | 1.0 1.5 2.0 3.0 | 9.0 8.5 8.0 7.0 | 8.2 8.4 8.7 9.0 | 3.5 4.5 6.0 8.0 | 6.5 5.5 4.0 2.0 |
硼砂Na2B4O7·H2O,分子量=381.43;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。
硼酸H2BO3,分子量=61.84,0.2M溶液为12.37克/升。
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
11．硼酸-硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）
pH | 0.05M硼砂（毫升） | 0.2M硼酸（毫升） | pH | 0.05M硼砂（毫升） | 0.2M硼酸（毫升） |
7.4 7.6 7.8 8.0 | 1.0 1.5 2.0 3.0 | 9.0 8.5 8.0 7.0 | 8.2 8.4 8.7 9.0 | 3.5 4.5 6.0 8.0 | 6.5 5.5 4.0 2.0 |
硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。
硼酸H2BO3，分子量=61.84, 0.2M溶液为12.37克/升。
硼砂 易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M）
X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升0.2NnaOH加水稀释至200毫升
pH | X | Y | pH | X | Y |
8.6 8.8 9.0 9.2 9.4 | 50 50 50 50 50 | 4.0 6.0 8.8 12.0 16.8 | 9.6 9.8 10.0 10.4 10.6 | 50 50 50 50 50 | 22.4 27.2 32.0 38.6 45.5 |
甘氨酸分子量=75.07;0.2M溶液含15.01克/升。
13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根）
X毫升0.05M硼砂+Y毫升0.2NNaOH加水稀释至200毫升
pH | X | Y | pH | X | Y |
9.3 9.4 9.6 | 50 50 50 | 6.0 11.0 23.0 | 9.8 10.0 10.1 | 50 50 50 | 34.0 43.0 46.0 |
硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液为19.07克/升。
14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M）
Ca2+、Mg2+存在时不得使用
pH | 0.1MNa2CO3(毫升) | 0.1MN2HCO3(毫升) | |
20℃ | 37℃ | ||
9.16 9.40 9.51 9.78 9.90 10.14 10.28 10.53 10.83 | 8.77 9.12 9.40 9.50 9.72 9.90 10.08 10.28 10.57 | 1 2 3 4 5 6 7 8 9 | 9 8 7 6 5 4 3 2 1 |
Na2CO2·10H2O分子量=286.2;0.1M溶液为28.62克/升。
N2HCO3分子量=84.0;0.1M溶液为8.40克/升。
15．“PBS”缓冲液
PH | 7.6 | 7.4 | 7.2 | 7.0 |
H2O NaCl Na2HPO4 NaH2PO4 | 1000 8.5 2.2 0.1 | 1000 8.5 2.2 0.2 | 1000 8.5 2.2 0.3 | 100ml 8.5g 2.2g 0.4g |
转自“色谱世界”
应助达人
迎国庆送壕礼！十月发帖抢大疆云台
【官方邀请】高效液相色谱使用情况有奖调研
喜迎国庆！第十七届原创大赛超级原创日参赛奖励翻倍
丹纳赫四十周年寄语征集领大礼包
